使用生物显微镜时应注意的事项
⒈取放时动作一定要轻,切忌震动和暴力,否则会造成光轴偏斜而影响观察,而且光学玻璃也容易损坏。
⒉由于物镜的螺丝口容易损伤,安装物镜时要特别小心,即先向左方倒转一小段,凹凸双方吻合后再向右方旋转,不要转的太紧,轻轻捻到头,再稍紧即可。
⒊镜检标本应严格按照操作程序进行,观察时要从低倍镜开始,看清标本后再转用高倍镜、油镜。
⒋使用油镜时一定要在盖玻片上滴油后才能使用。油镜使用完后,应立即将镜头、盖玻片上的油擦干净,否则干后不易擦去,以致损伤镜头和标本。但应注意二甲苯用量不可过多,否则,物镜中的树胶溶解,透镜歪斜甚至脱落,盖玻片移动甚至连同标本一起融掉。
⒌使用时不可用手摸光学玻璃部分,如需擦拭应严格按照光学部件擦拭办法。
⒍使用的盖玻片和载玻片不能过厚或过薄。标准的盖玻片为0.17±0.02毫米,载玻片为1.1±0.04毫米。过厚或过薄将会影响显微镜成像及观察。
1.低倍镜的使用方法
(1)取镜和放置:显微镜平时存放在柜或箱中,用时从柜中取出,右手紧握镜臂,左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上,镜座后端距桌边1-2寸为宜,便于坐着操作。
(2)对光:用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物镜移动),使低倍镜对准镜台的通光孔(当转动听到碰叩声时,说明物镜光轴已对准镜筒中心)。打开光圈,上升集光器,并将反光镜转向光源,以左眼在目镜上观察(右眼睁开),同时调节反光镜方向,直到视野内的光线均匀明亮为止。
(3)放置玻片标本:取一玻片标本放在镜台上,一定使有盖玻片的一面朝上,切不可放反,用推片器弹簧夹夹住,然后旋转推片器螺旋,将所要观察的部位调到通光孔的正中。
(4)调节焦距:以左手按逆时针方向转动粗调节器,使镜台缓慢地上升至物镜距标本片约5毫米处,应注意在上升镜台时,切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着镜台上升,以免上升过多,造成镜头或标本片的损坏。然后,两眼同时睁开,用左眼在目镜上观察,左手顺时针方向缓慢转动粗调节器,使镜台缓慢下降,直到视野中出现清晰的物象为止。
如果物象不在视野中心,可调节推片器将其调到中心(注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的)。如果视野内的亮度不合适,可通过升降集光器的位置或开闭光圈的大小来调节,如果在调节焦距时,镜台下降已超过工作距离(>5.40mm)而未见到物象,说明此次操作失败,则应重新操作,切不可心急而盲目地上升镜台。
2.高倍镜的使用方法
(1)选好目标:一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心,同时把物象调节到最清晰的程度,才能进行高倍镜的观察。
(2)转动转换器,调换上高倍镜头,转换高倍镜时转动速度要慢,并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片),如高倍镜头碰到玻片,说明低倍镜的焦距没有调好,应重新操作。
(3)调节焦距:转换好高倍镜后,用左眼在目镜上观察,此时一般能见到一个不太清楚的物象,可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5-1圈,即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!)
如果视野的亮度不合适,可用集光器和光圈加以调节,如果需要更换玻片标本时,必须顺时针(切勿转错方向)转动粗调节器使镜台下降,方可取下玻片标本。
3.生物显微镜油镜的使用方法
(1)在使用油镜之前,必须先经低、高倍镜观察,然后将需进一步放大的部分移到视野的中心。
(2)将集光器上升到最高位置,光圈开到最大。
(3)转动转换器,使高倍镜头离开通光孔,在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油,然后慢慢转动油镜,在转换油镜时,从侧面水平注视镜头与玻片的距离,使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜。
(4)用左眼观察目镜,并慢慢转动细调节器至物象清晰为止。
如果不出现物象或者目标不理想要重找,在加油区之外重找时应按:低倍→高倍→油镜程序。在加油区内重找应按:低倍→油镜程序,不得经高倍镜,以免油沾污镜头。
(5)油镜使用完毕,先用擦镜纸沾少许二甲苯将镜头上和标本上的香柏油擦去,然后再用干擦镜纸擦干净。
(一) 显微镜的构造及各部名称 关于显微镜的结构与使用方法已于生物学和组织胚胎学课程中学过,在寄生虫学的学习中,要求进一步熟练使用。
显微镜的构造及各部名称见图1。 (二) 显微镜的使用 利用自然光源镜检时,最好用朝北的光源,不宜3采用直射阳光;利用人工光源时,宜用日光灯的光源。
镜检时身体要正对实习台,采取端正的姿态,两眼自然张开,左眼观察标本,右眼观察记录及绘图,同时左手调节焦距,使物象清晰并移动标本视野。右手记录、绘图。
镜检时载物台不可倾斜,因为当在五套载物台倾斜时,液体或油易流出,既损坏了标本,又污染载物台,也影响检查结果。 图1 显微镜 镜检时应将标本按一定方向移动视野,直至整个标本观察完毕,以便不漏检,不重复。
显微镜的重光为对光,接物镜的转换及光线的调节。观察寄生虫标本时,光线调节甚为重要。
因为所观察的标本如虫卵、包囊等,均为自然光状态的物体,有大有小,色泽有深有浅,有的无色透明,而低倍、高倍接物镜转换较多,故须随着镜检时对不同标本和要求,需要随时调节焦距和光线,这样才能使观察的物象清晰。在一般情况下,染色标本光线宜强,无色或未染色标本光线宜弱;低倍镜观察光线宜弱,高倍镜观察光线宜强。
1. 对光: (1)将低倍镜转至镜筒下方与镜筒成一直线。 (2)拨动反光镜,调节至视野最亮无阴影。
反光镜有平、凹两面,光源强时用平面,较暗时用凹面,需要强光时,将聚光器提高,光圈放大;需要弱光时,将聚光器降低,或光圈适当缩小。 (3)将待观察的标本置载物台上,转动粗调节器使镜筒下降至接物镜接近标本。
于转动粗调节器的同时,须俯身在镜旁仔细观察接物镜与标本之间的距离。 (4)左眼于接目镜观察,同时左手转动粗调节,使镜筒徐徐上升以调节焦距,使视野内的物象看到上时即停,再调微调节器,至标本清晰为止。
2. 接物镜的使用及光线的调节: 显微镜一般具有三个接物镜,即低倍、高倍及油镜,固定于接物镜转换盘孔中。观察标本时,先使用低倍接物镜,此时,视野较大,标本较易查出,但放大倍数较小(一般放大100倍),较小的物体不易观察其结构。
高倍接物镜放大的倍数较大(一般放大400倍),能观察微小的物体或结构。 寄生虫的蠕虫卵,微丝蚴,原虫的滋养体及包囊,昆虫的幼虫,均使用低、高倍镜。
组织细胞内的原虫,则使用油镜。使用低、高倍镜观察,如在低倍镜下不能准确鉴定所见的物体或其内部构造时,则转高倍镜观察。
使用油镜观察,一般加一滴油后直接将油镜头浸入油滴中进行镜检观察。 3. 低倍、高倍、油镜头的识别: (1)标明放大倍数10*,40*,100*,或10/0.25,40/0.65,100/1.30。
(2)低倍镜最短,高倍镜较长,油镜最长。 (3)镜头前面的镜孔低倍镜最大,高倍镜较大,油镜最小。
(4)油镜头上常刻有黑色环圈,或“油”字。 4. 低倍镜换高倍镜的使用方法: (1)光线对好后,移动推进器寻找需要观察的标本。
(2)如标本的体积较大,不能清楚查见其构造因而不能确认时,则将标本移至视野中央,再旋转高倍接物镜于镜筒下方。 (3)旋转微调节器至物象清晰为止。
(4)调节聚光器及光圈,使视野内的物象达到最清晰的程度。 5. 油镜的使用方法: (1)原理:使用油镜观察时,需加香柏油,因为油镜需要进入镜头的光线多,但油镜的透气孔最小,这样进入的光线就少,物体不易看清楚。
同时又因自玻片透过的光线,由于介质(玻片-空气-接物镜)密度(玻片:n=1.52,空气:n=1.0)不同而发生了折射散光,因此射入镜头的光线就更少,物体更看不清楚。于是采用一种和玻片折光率相接近的介质如香柏油,加于标本与玻片之间,使光线不通过空气,这样射入镜头的光线就较多,物象就看得清楚(图2)。
(2)油镜的使用: a.将光线调至最强程度(聚光器提高,光圈全部开放)。 b.转动粗调节器使镜筒上升,滴香柏油1小滴(不要过多,不要涂开)于接物镜正下方标本上。
c.转动接物镜转换盘,使油镜头于镜筒下方。 d.俯身镜旁侧面在肉眼的观察下,转动粗调节器使油镜头徐徐下降浸入香柏油内,轻轻接触玻片为止。
e.慢慢转动粗调节器,使油镜头徐徐上升至见到标本的物象为止。 f.转动微调节器,使视野物象达到最清晰的程度。
g.左手徐徐移动推进器,并转动微调节器以观察标本。 h.标本观察完毕后,转动粗调节器将镜筒升起,取下标本玻片。
立即用擦镜纸将镜头上的香柏油擦净。 6. 注意事项: (1)使用显微镜之前,应熟悉显微镜的各部名称及使用方法,特别应掌握识别三种接物镜之特征。
(2)寄生虫学实习中所观察的标本,大多数为无色和颜色较浅,因此必须注意光线的调节。 (3)新鲜标本观察时,须加盖玻片,以免标本因蒸发而干燥变形或污染侵蚀接物镜,同时可使标本表面匀平,光线得以集中,有利于观察。
(三) 显微镜的保养 图3 加用盖玻片后,标本表面匀平,光线得以集中,便于检查示意图1.显微镜在从木箱中取出或装箱时,右手紧握镜臂,左手稳托镜座,轻轻取出。不要只用一只手提取,以防显微镜坠落,然后轻轻放在实习台上或装 入木箱内。
2.显微镜放到实习台上时,先放镜座。
应注意事项: ①保护好显微镜的镜头; ②旋转粗准焦螺旋不要用力过猛; ③载物台要保持清洁; ④使用低倍镜观察; ⑤物镜不要碰到载玻片以免打碎载玻片; ⑥如何移动玻片来选择较好的观察部位; ⑦如何区分盖玻片上的脏东西以及气泡。
详细步骤: 关键是对光和观察 转动转换器使低倍物镜对准通光孔; 转动遮光器使最大的光圈对准通光孔, 再注视目镜 手调节反光尝矗佰匪脂睹拌色饱姬镜 使视野呈雪白色 把标本放上去 转动粗准焦螺旋使镜筒下降 然后就边注视显微镜视野内 边调粗准焦螺旋 直到视野出现物象 再微调细准焦螺旋 使物象更清晰!。
1、条件许可情况下,建议试验室应具备三防条件:防震、防潮、防尘;电源:220V±10%,50HZ;温度:0°C—40°C。
2、亮度调整切忌忽大忽小,也不要过亮,影响灯泡的使用寿命,同时也有损视力。
3、所有(功能)切换,动作要轻,要到位。
4、关机时要将亮度调到最小。
5、调焦时注意不要使物镜碰到试样,以免划伤物镜。
6、当载物台垫片圆孔中心的位置远离物镜中心位置时不要切换物镜,以免划伤物镜。
7、非专业人员不要调整照明系统(灯丝位置灯),以免影响成像质量。
8、更换卤素灯时要注意高温,以免灼伤;注意不要用手直接接触卤素灯的玻璃体。
9、关机不使用时,将物镜通过调焦机构调整到最低状态。
10、关机不使用时,不要立即该盖防尘罩,待冷却后再盖,注意防火。
显微镜使用时的注意事项
1.取送方法要正确。因为反光镜是通过镜柄插放在镜臂下面的,目镜是插放在镜筒上端的,所以,它们很容易滑落而损坏。取送显微镜时一定要右手握住镜臂,左手托住镜座,在任何情况下都不准用一只手提着显微镜。另外,也不准许学生取下反光镜和目镜乱照乱摸。
2.镜头的保护。目镜和物镜平时放在显微镜箱内的专用的盒内。上实验课期间,为了防止落上灰尘,要制作专用的塑料袋或布袋,课间时要随时罩好。镜头脏了,只能用专用的擦镜纸擦拭,擦时要顺着一个方向擦。如果擦拭不净,最好蘸一点二甲苯继续擦。注意,决不能把镜头放到二甲苯中浸泡,这样会使镜头开胶,镜片脱落。
3.粗、细准焦螺旋的使用和防止镜筒下滑。一般地说,粗、细准焦螺旋各转动一周,可以使镜筒分别移动10 mm和0.1 mm。要使镜筒下降时,一定要用眼睛直接看着物镜,使镜筒缓缓下降。否则,很容易砸坏物镜和玻片标本。
显微镜使用时间过长,镜筒容易出现下滑现象。如果情况不太严重,教师可以进行如下简易维修:老式显微镜镜臂的上端有两个控制镜筒松紧的螺丝,只要顺时针拧动螺丝,镜筒就拧紧了;对于国产的新式显微镜,镜筒的松紧是通过两个粗准焦螺旋来调节的。左手握紧左侧粗准焦螺旋,右手顺时针方向拧紧粗准焦螺旋,镜筒就拧紧了。如果情况严重,要及时送到修理部门维修。
4.转换器的使用。转动转换器时,不要用手指扳着物镜。这样时间长了,容易使物镜镜头松动,改变焦距,影响观察的清晰度。正确的方法是手指握准转换器的边缘进行转动。
5.制作目镜上的指示针。在演示或考察学生观察效果时,最好用带有指示针的目镜。简易的做法是:轻轻拆开目镜,将一根短头发的一端用胶水粘在目镜内里的边缘,另一端指向目镜圆心的附近。观察时,轻轻地转动目镜,指示针就能够指出视野内的不同部位。
应注意事项:①保护好显微镜的镜头;②旋转粗准焦螺旋不要用力过猛;③载物台要保持清洁;④使用低倍镜观察;⑤物镜不要碰到载玻片以免打碎载玻片;⑥如何移动玻片来选择较好的观察部位;⑦如何区分盖玻片上的脏东西以及气泡。
详细步骤:关键是对光和观察转动转换器使低倍物镜对准通光孔;转动遮光器使最大的光圈对准通光孔,再注视目镜 手调节反光镜 使视野呈雪白色把标本放上去 转动粗准焦螺旋使镜筒下降然后就边注视显微镜视野内 边调粗准焦螺旋直到视野出现物象 再微调细准焦螺旋 使物象更清晰!。
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