常用的色谱方法(常用的色谱定量方法)
1.有哪些常用的色谱定量方法
色谱分析常用的定量方法：归一化法、内标法和内加（增量）内标法、外标法。
1、面积归一化法优点是简便、准确，当操作条件变化时对结果影响较小，宜于分析多组分试样中各组分的含量。但是试样中所有组分必须全部出峰，因此，此法在使用中受到一定限制。
2、外标法是用纯物质配成一系列不同浓度的标准溶液（或直接购买不同浓度标准溶液）分别取一定体积，注入色谱仪，根据峰面积和浓度做标准曲线。在分析未知样时按与标准曲线相同的操作条件和方法，由标准曲线查出所需组分的浓度（现在在工作站上直接就能求出浓度）。
此法要求进样准确，操作条件稳定，分析样品和标准曲线条件必须一致。 3、内标法是试样中所有组分不能全部出峰或只要求测定试样中某个或某几个组分时，可采用此法。
内标法是在准确称取一定量的试样中，加入一定的标准物质（内标物），根据内标物和试样的质量以及色谱图上的相应峰面积，计算待测组分的含量。内标法的关键是选择合适的内标物，内标物应是试样中不存在的纯物质，物质与被测物质相近，能溶于样品中，但不能于样品发生反应。
此法比较费事，一般不使用于快速分析。
2.有哪些常用的色谱定量方法
色谱定量方法比较2006年12月20日
星期三
15:31定量分析常用术语：
样品（sample）含有带测物，供色谱分析的溶液。分为标样和未知样。
标样（standard）浓度已知的纯品。
未知样（unknow）浓度待测的混合物。
样品量（sample
weight）待测样品的原始称样量。
稀释度（dilution）未知样的稀释倍数。
组分（componance）欲做定量分析的色谱峰，即含量未知的被测物。
组分的量（amount）被测物质的含量（或浓度）。
积分（integerity）由计算机对色谱峰进行的峰面积测量的计算过程。
校正曲线（calibration
curve）组分含量对响应值的线性曲线，由已知量的标准物建立，用于测定待测物的未知含量。
常用的定量方法
标准曲线法，分为外标法和内标法。
外标法在液相色谱中用的最多。
内标法准确但是麻烦，在标准方法中用的最多。
外标法
用被测化合物的纯品作为标准样品，配制成一系列的已知浓度的标样。
注入色谱柱的到其响应值（峰面积）。
在一定范围内，标样的浓度与响应值之间存在较好的线性关系，即W=f*A，制成标准曲线。
在完全相同的实验条件下，注入未知样品，得到欲测组分的响应值。
根据已知的系数f，即可求出欲测组分的浓度
外标法的优点：
操作、计算简单，是一种常用的定量方法。
无需各组分都被检出、洗脱。
需要标样。
标样及未知样品的测定条件要一致。
进样体积要准确。
外标法缺点：
实验条件要求高，如检测器的灵敏度，流速、流动相组成的不能发生变化；每次进样体积要有好的重复性。
内标法
操作：
将已知量的内标样加入标准样品，制成混合标样，并配制一系列的已知浓度的工作标样。混合标样中标样与内标样的摩尔比不变。
注入色谱柱，以（标样峰面积/内标样峰面积）为响应值。
根据响应值与工作标样浓度之间存在的线性关系，即W=f*A，制成标准曲线。
将已知量的内标样加入未知样品，注入色谱柱，得到欲测组分的响应值。
根据已知的系数f，即可求出欲测组分的浓度
内标法的特点：
操作过程中样品和内标是混合在一起注入色谱柱的，因此只要混合溶液中被测组分与内标的量的比值恒定，上样体积的变化不会影响影响定量结果。
内标法抵消了上样体积，乃至流动相、检测器的影响，因此比外标法精确。
3.常见的色谱分离方法有哪些
常见的色谱分离方法有哪些
液相色谱按分离机理分为吸附、分配、交换、排阻以及亲和五种类型.
利用组分在吸附剂（固定相）上的吸附能力强弱不同而得以分离的方法，称为吸附色谱法.固定相是固体，目前这种分离模式在液相色谱中用途很小.
利用组分在固定液或者键合固定相（固定相）中溶解度不同而达到分离的方法称为分配色谱法.固定相是涂覆的固定液或者键合的固定相，是目前主流的分离模式，涵盖了目前液相色谱应用范围的大部.
利用组分在离子交换剂（固定相）上的亲和力大小不同而达到分离的方法，称为离子交换色谱法.该分离模式主要用来分离离子型化合物，正是由于如此，现在离子色谱已经从液相色谱中分离出来，称为离子色谱.
利用大小不同的分子在多孔固定相中的选择渗透而达到分离的方法，称为凝胶色谱法或尺寸排阻色谱法.这个主要用来分离高分子子化合物，比如蛋白、比如聚合物.
利用不同组分与固定相（固定化分子）的高专属性亲和力进行分离的称为亲和色谱法，常用于蛋白质分离.
4.色谱法有哪四种常见的方法
高效液相色谱法处理，以指示的 ①的高压力：更大的阻力，流动的液体通过高压迅速通过该柱通过柱的流动相，液体载体。
②高效：分离效率高。选择一个固定相和流动相，以便达到最佳的分离效果，并且是工业精馏塔和气相色谱分离性能高出许多倍。
③高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，μL级的注射量。的 ④由高性能液相色谱法分析，特别是高沸点的分离和分析，大分子，强极性，热稳定性差的化合物，可用于广泛的应用范围：70%以上的有机化合物的，示出的优点。
⑤分析速度快，载液的流速快：速度更快，更经典的液相色谱通常在15至30分钟的样品分析，部分样品甚至在五分钟内完成，一般不超过1小时。 此外，高效液相层析柱可？？反复使用，和样品不被破坏，易回收等优点，但也有缺点，与气相色谱法相比，有自己的长处和优势互补。
的缺点的高性能液相色谱法“列效果。从喷射器到检测器上，在除了比支柱死空间（喷射器，柱接头，连接管和检测器单元等）的任何其他的类型，如果流动相流量的变化在任何要被分离和滞留的物质的扩散会导致扩大的峰，柱效降低显著高性能液相色谱检测器的灵敏度是小于在气相色谱仪中。
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5.分离纯化常用的色谱分离方法有哪些
1、色谱方法根据分离机制的不同可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、凝胶过滤（分子筛）色谱和亲和色谱等.2、（1）吸附色谱法是指混合物随流动相通过吸附剂时，由于该吸附剂对不同物质有不同的吸附力而使混合物分离的方法.（2）分配色谱系法是利用固定相与流动相之间对待分离组分溶解度的差异来实现分离.（3）离子交换色谱法是利用离子交换原理和液相色谱技术的结合来测定溶液中阳离子和阴离子的一种分离分析方法.凡在溶液中能够电离的物质通常都可以用离子交换色谱法进行分离.（4）凝胶色谱法又叫凝胶色谱技术，是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离分析技术，由于设备简单、操作方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很高的分离效果.（5）亲和色谱法是将相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相，利用与固定相不同程度的亲和性，使成分与杂质分离的色谱法.。
6.色谱分析中常用的分析方法有哪些
环境监测中常用到的色谱分析方法有： 气相色 谱法、高效液相色谱法、离子色谱法。
环境监测是通过对人类和环境有影响的各种物质的含量、排放量的检测，跟踪环境质量的变化，确定环境质量水平，为环境管理、污染治理等工作提供基础和保证。简单地说，了解环境水平，进行环境监测，是开展一切环境工作的前提。
环境监测通常包括背景调查、确定方案、优化布点、现场采样、样品运送、实验分析、数据收集、分析综合等过程。总的来说，就是计划-采样-分析-综合的获得信息的过程。
7.常用的层析分析方法有哪些
在分离分析特别是蛋白质分离分析中，层析是相当重要、且相当常见的一种技术，其原理较为复杂，对人员的要求相对较高，这里只能做一个相对简单的介绍。
一、吸附层析 1、吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。 2、薄层层析 薄层层析是以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相，以液体为流动相的一种层析方法。
这种层析方法是把吸附剂等物质涂布于载体上形成薄层，然后按纸层析操作进行展层。 3、聚酰胺薄膜层析 聚酰胺对极性物质的吸附作用是由于它能和被分离物之间形成氢键。
这种氢键的强弱就决定了被分离物与聚酰胺薄膜之间吸附能力的大小。层析时，展层剂与被分离物在聚酰胺膜表面竞争形成氢键。
因此选择适当的展层剂使分离在聚酰胺膜表面发生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程，就能导致分离物质达到分离目的。 常用的层析分析方法，登录生物帮看看。
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