接种微生物实际上就单单指把微生物移种到需要的地方,至于你说的方法,应该说是在一些情况下根据不同的需要采取不同的操作手段从而让微生物的某些特性表现出来。那么这些操作手段其实是很多的,并不限于固定的操作方式,完全可以合理地自行设计,也不太好归纳。
比如,如果只需要在液体中增菌,那么只需要稍微将带菌的接种环碰一下液体培养基就可以了;需要分离单个菌落,往往采取的是四区划线法转种琼脂平板;需要观察动力,往往穿刺接种于动力培养基;需要观察单个菌落和周围培养基环境的作用往往采取点种;需要计数活菌菌落,往往倾倒琼脂接种,等等等等。
常用的免疫接种方法有如下几种:
(1)点眼、滴鼻法
是雏禽常用的免疫方法。常用的疫苗有新城疫Ⅱ系或Ⅳ系苗、鸡传染性法氏囊病弱毒苗、鸡传染性支气管炎弱毒苗、鸡传染性喉气管炎弱毒苗等。
(2)饮水法
适用于大群禽群体,方法简单适用,应激反应小。新城疫Ⅱ系或Ⅳ系苗、传染性法氏囊病苗、球虫苗、传染性支气管炎苗均可适用。为提高免疫效果,常在饮用水加入少量的脱脂奶粉(每升水加1.6克奶粉),稀释疫苗的水不宜太多,通常控制在30分钟内饮完,在饮前控水2小时,要保证每只禽都能饮到疫苗稀释液。
(3)肌肉注射法
此法吸收好、作用快、剂量准,缺点是费工费时,适用4周龄以上禽类。常用于新城疫油乳苗、鸡产蛋下降综合征油乳苗、禽霍乱组织灭活菌苗、禽脑脊髓炎油乳苗及多种高免血清或高免卵黄抗体。
(4)颈部皮下注射法
此法常用于1日龄雏鸡接种马立克氏病疫苗、鸡新城疫油乳苗、鸡病毒性关节炎油乳苗、鸡传染性贫血灭活疫苗等。
(5)气雾免疫法
此法适用于规模化、集约化程度高的禽场大群禽的免疫,省工省时,只要技术要领掌握好则效果也确切。常用于鸡新城疫的Ⅱ系或Ⅳ系苗以及传染性支气管炎弱毒苗的免疫。作气雾免疫时喷枪的雾滴大小成鸡直径应在5~10微米,雏鸡应在30~50微米为宜,疫苗宜使用蒸馏水或去离子水稀释。
(6)皮肤刺种法
此法是用消毒过的蘸水笔尖蘸取稀释好的疫苗在翼下无毛及无血管处刺种一下即可。常用于禽痘苗、新城疫Ⅰ系苗的免疫。
预防免疫已成为家禽疾病防治中的重要环节,在生产实践中常用的免疫接种方法有滴鼻、点眼免疫法,饮水免疫法,注射免疫法和喷雾免疫法,必须掌握正确的免疫接种方法及其注意事项。具体选用哪种接种方法应根据疫苗种类、日龄及免疫目的而定,一般应以疫苗的说明书为准。
(1)滴鼻、点眼免疫
滴鼻、点眼免疫能确保每只鸭得到准确疫苗量,达到快速免疫,形成良好的局部免疫,抗体效果好,用于弱毒活疫苗的接种,适应于任何日龄,对于幼雏来说,这种方法可以避免或减少疫苗病毒被母源抗体的中和,免疫效果较好。这种免疫法可以产生整齐、均匀的免疫力,节省疫苗,但是逐只接种,比较费时费力。操作时应使用厂家配套的稀释液和滴头;配制疫苗时摇动不要太剧烈;疫苗要现配现用,2小时内用完;疫苗避免受热和阳光照射;点眼时滴头距离眼1厘米,以防戳伤眼;滴鼻时,用食指封住一侧鼻孔,以便疫苗滴能快速吸入;滴鼻、点眼时,待疫苗在眼或鼻孔吸收后再放开鸭;免疫接种后的废弃物应焚毁。
(2)饮水免疫
饮水免疫是一种便捷的接种方法,在生产中应用较多,将一定量疫苗放入水中让鸭自由饮用,通过吞咽疫苗,病毒离子经腭裂、鼻腔、肠道,产生局部免疫及全身免疫。比个体免疫省时省力,但饮水免疫疫苗用量多,免疫不均匀,个体饮入疫苗量不准确。为保证免疫效果,必须注意用于饮水免疫的疫苗是高效价的,免疫前可加免疫增效剂;免疫前后3天不能饮水消毒;免疫前后1~2天禁止使用抗病毒药物;免疫前视季节和舍温情况限水2~3小时,以便及时饮水,并在短时间内饮完;在水中加入0.2%~0.3%的脱脂奶粉;不能使用金属器皿,稀释疫苗用水量要适当,使用清洁不含氯、铁等离子的水稀释。
(3)注射免疫
注射接种最常用的是皮下注射、皮内注射、肌内注射、静脉注射等免疫方法。注射接种时,要注意油乳剂疫苗启封后,要在当天用完,活疫苗在2小时内用完;接种过程中,注意摇匀疫苗;注射器要严格消毒,勤换针头;接种前将油乳剂疫苗放置至温度25℃左右,一般至室温;疫苗使用时不要直接倾倒,以免污染,可以用干净的连续注射器抽取;接种过程中注意调校注射器以保证剂量准确;油乳剂疫苗如有冻结破裂现象、异物或杂质存在不能使用;注射两种油乳剂疫苗时,应避免两种疫苗接种在同一点上。
(4)喷雾免疫
此方法是用压缩空气通过气雾发生器,使稀释的疫苗形成直径1~10微米的雾化粒子,均匀的浮游于空气中,随呼吸而进入体内,以达到免疫的目的。免疫前后可使用抗应激的药物,来增强免疫效果。操作时,应该注意使用高效价的疫苗,剂量加倍;用蒸馏水或去离子水稀释疫苗;雾粒直径以1~10微米为最佳;气雾免疫时房舍应密闭,减少空气流动,并应无直射阳光为好。这种方法省时省力,适宜大群的免疫接种,有时会诱发呼吸道疾病。
微生物接种
常用的接种方法有以下几种:
1)划线接种 这是最常用的接种方法。即在固体培养基表面作来回直线形的移动,就可达到接种的作用。常用的接种工具有接种环,接种针等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。
2)三点接种 在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少量的微生物接种在平板表面上,成等边三角形的三点,让它各自独立形成菌落后,来观察、研究它们的形态。除三点外,也有一点或多点进行接种的。
3)穿刺接种 在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。做穿刺接种时,用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的做法是:用接种针蘸取少量的菌种,沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺,如某细菌具有鞭毛而能运动,则在穿刺线周围能够生长。
4)浇混接种 该法是将待接的微生物先放入培养皿中,然后再倒入冷却至45°C左右的固体培养基,迅速轻轻摇匀,这样菌液就达到稀释的目的。待平板凝固之后,置合适温度下培养,就可长出单个的微生物菌落。
5)涂布接种 与浇混接种略有不同,就是先倒好平板,让其凝固,然后再将菌液倒入平板上面,迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布,让菌液均匀分布,就可长出单个的微生物的菌落。
6)液体接种 从固体培养基中将菌洗下,倒入液体培养基中,或者从液体培养物中,用移液管将菌液接至液体培养基中,或从液体培养物中将菌液移至固体培养基中,都可称为液体接种。
7)注射接种该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内,如人或其它动物中,常见的疫苗预防接种,就是用注射接种,接入人体,来预防某些疾病。
8)活体接种 活体接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法,因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。所用的活体可以是整个动物;也可以是某个离体活组织,例如猴肾等;也可以是发育的鸡胚。接种的方式是注射,也可以是拌料喂养。
免疫接种是将疫苗或菌苗经一定途径接种于鸡体,使鸡在不发病的情况下产生免疫应答,从而在一定时期内对某种传染病具有抵抗力。
不同的疫苗,对接种方法有不同的要求,为了发挥疫苗的应有效力,接种的方法应尽量接近疾病自然的传播方式。常用于免疫接种的方法有以下几种。
(1)滴鼻与点眼 适用于新城疫Ⅱ系和Ⅳ系苗、“传染性支气管炎”弱毒苗等,优点是只要操作认真,则每只鸡的接种量比较均匀,缺点是比较费工。
滴鼻和点眼可用滴管、空眼药水瓶或5毫升注射器(针尖磨秃),事前用1毫升水试一下,看有多少滴。2周龄以下的雏鸡以每毫升50滴为好,每鸡2滴,每毫升滴25只鸡,如果1瓶疫苗是用于250只鸡的,就稀释成250/25=10毫升。比较大的鸡以每毫升25滴为好,上述1瓶疫苗就要稀释成20毫升。疫苗应当用生理盐水或注射用水稀释,不宜用冷开水,以免其中的盐碱等杂质杀死一部分病毒,影响效果。
滴鼻与点眼的效果没有明显差别,每鸡两滴可以滴在一个鼻孔、两个鼻孔或鼻眼各一滴,不过一只眼内不能容纳2滴。要看到每一滴疫苗确实被鸡吸进鼻腔或在眼内耗下去,才能将鸡放开。
(2)饮水法 是把疫苗混入水中让鸡自由饮用。它的优点是省工省时,适用于大群鸡同时接种,应激反应小,缺点是由于饮水不均等以及其他因素的干扰,免疫效果不整齐,疫苗用量大,适于饮水的疫苗有新城疫疫苗、传染性支气管炎疫苗、传染性法氏囊弱毒疫苗等。
饮水免疫的注意事项:
疫苗效价应高,要加大1.5~2倍用量。
配制疫苗的水中不能含有任何损害疫苗的物质,如氯、铁、铜、锌等离子和消毒剂,最好用冷开水。
饮水器要充分洗干净,不含上述有害物质,数量要充足,保证鸡同时都能饮到水。
饮水中应加0.2%的脱脂奶粉或2%的脱脂牛奶,以保护疫苗或病毒。
含有疫苗的饮水应在2小时之内饮完,要做到这一点,事先要停供饮水3~5小时(依不同季节酌定)。停水后,鸡的渴欲较强,2小时的饮水量大约是:5~7日龄每鸡4~5毫升,10~14日龄8毫升,20日龄12毫升,28日龄17毫升,40~45日龄28毫升,开产前80毫升。鸡饮完后再停食1小时。
饮水免疫必须反复进行,至少应在2天内进行2次,以保证免疫效果。
(3)刺种法 此法适用于鸡痘疫苗、新城疫疫苗等。刺种时按100头份疫苗加1毫升生理盐水、蒸馏水或冷开水,溶化均匀,用刺种针或钢笔尖蘸取疫苗,在翅下无血管处刺种1~2下,要保证每只鸡得到小米粒大小的一滴疫苗。
(4)注射法 此方法是把疫苗注射到皮下或肌肉内,其剂量准确,效果确实,但费时费工。适用于鸡马立克氏病疫苗、新城疫Ⅱ系疫苗、鸡霍乱苗和各种灭活苗,注射时冻干苗按每头份加稀释液0.5~1毫升溶匀后在颈部或胸部或其他部位的皮下或肌肉内注射0.5~1毫升。马立克氏病苗必须用厂家指定的专用稀释液,稀释后每只雏鸡颈部皮下注射0.2毫升。各种灭活苗(铝胶苗或油苗)按说明用量皮下或肌肉注射。
胸部肌肉注射时针头不可垂直刺入或刺入过深,以免刺伤内脏引起死亡,腿部注射应在外侧肌肉丰满处注射,不可在内侧注射以免刺伤血管和神经引起出血和跛行。
(5)气雾 气雾免疫的方法,是将鸡置于密闭的室内,用专门的气雾器将稀释过的疫苗喷成极细的小滴,弥漫在空气中,使鸡吸入肺部深入及气囊。此法适用于“传支”弱毒苗等,免疫效果比较好,但对鸡的呼吸器官刺激较大,常引起不良反应,故较少应用。
接种常见方法有:平板划线接种法、斜面接种法、倾注培养法、穿刺接种法、液体接种法。
一、平板划线分离法
平板划线分离法:是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面,通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养后生长繁殖成单菌落,通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。
二、斜面接种法
该法主要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性。
三、穿刺接种法
穿刺培养,是指将带有欲培养微生物的接种针深插至半固体培养基(琼脂含量0.2%〜1.0%)中接种,并进行微生物固体深层培养的一种方法,主要用于厌氧或兼性厌氧微生物的培养。
四、液体接种法
液体培养,是指将微生物直接接种于液体培养基中,并不断振荡或搅拌,使微生物均匀地在液体培养基中生长繁殖的一种培养方法。液体培养适用于好氧微生物和植物组织培养,以迅速得到大量繁殖体为目的。
五、涂布接种法
微生物学实验中的一种操作方法。由于将含菌材料现加到还较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡,而且采用稀释倒平台法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长,因此在微生物学研究中更常用的纯种分离方法是涂布平板法。
扩展资料:
接种注意事项
1、每次接种时间最长不得连续超过2小时。
2、操作时,接种工具尖端和种块不能接触到管口和外部其它物体。工具尖端碰到外面物体要重换工具,种块碰到外面物体则作废。
3、一般用种量:每支试管母种可扩繁一级种100支左右;扩接原种6~8瓶。
参考资料:搜狗百科-接种
参考资料:搜狗百科-平板划线分离法
参考资料:搜狗百科-涂布平板法
参考资料:搜狗百科-穿刺培养
参考资料:搜狗百科-斜面法
参考资料:搜狗百科-液体接种
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