色谱分析的方法(色谱分析有几种定量方法)

1.色谱分析有几种定量方法

色谱分析常用的定量方法：归一化法、内标法和内加（增量）内标法、外标法。

1、面积归一化法优点是简便、准确，当操作条件变化时对结果影响较小，宜于分析多组分试样中各组分的含量。但是试样中所有组分必须全部出峰，因此，此法在使用中受到一定限制。

2、外标法是用纯物质配成一系列不同浓度的标准溶液（或直接购买不同浓度标准溶液）分别取一定体积，注入色谱仪，根据峰面积和浓度做标准曲线。在分析未知样时按与标准曲线相同的操作条件和方法，由标准曲线查出所需组分的浓度（现在在工作站上直接就能求出浓度）。

此法要求进样准确，操作条件稳定，分析样品和标准曲线条件必须一致。 3、内标法是试样中所有组分不能全部出峰或只要求测定试样中某个或某几个组分时，可采用此法。

内标法是在准确称取一定量的试样中，加入一定的标准物质（内标物），根据内标物和试样的质量以及色谱图上的相应峰面积，计算待测组分的含量。内标法的关键是选择合适的内标物，内标物应是试样中不存在的纯物质，物质与被测物质相近，能溶于样品中，但不能于样品发生反应。

此法比较费事，一般不使用于快速分析。

2.常用的层析分析方法有哪些

在分离分析特别是蛋白质分离分析中，层析是相当重要、且相当常见的一种技术，其原理较为复杂，对人员的要求相对较高，这里只能做一个相对简单的介绍。

一、吸附层析 1、吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。 2、薄层层析 薄层层析是以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相，以液体为流动相的一种层析方法。

这种层析方法是把吸附剂等物质涂布于载体上形成薄层，然后按纸层析操作进行展层。 3、聚酰胺薄膜层析 聚酰胺对极性物质的吸附作用是由于它能和被分离物之间形成氢键。

这种氢键的强弱就决定了被分离物与聚酰胺薄膜之间吸附能力的大小。层析时，展层剂与被分离物在聚酰胺膜表面竞争形成氢键。

因此选择适当的展层剂使分离在聚酰胺膜表面发生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程，就能导致分离物质达到分离目的。 常用的层析分析方法，登录生物帮看看。

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3.色谱法有哪四种常见的方法

高效液相色谱法处理，以指示的 ①的高压力：更大的阻力，流动的液体通过高压迅速通过该柱通过柱的流动相，液体载体。

②高效：分离效率高。选择一个固定相和流动相，以便达到最佳的分离效果，并且是工业精馏塔和气相色谱分离性能高出许多倍。

③高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，μL级的注射量。的 ④由高性能液相色谱法分析，特别是高沸点的分离和分析，大分子，强极性，热稳定性差的化合物，可用于广泛的应用范围：70%以上的有机化合物的，示出的优点。

⑤分析速度快，载液的流速快：速度更快，更经典的液相色谱通常在15至30分钟的样品分析，部分样品甚至在五分钟内完成，一般不超过1小时。 此外，高效液相层析柱可？？反复使用，和样品不被破坏，易回收等优点，但也有缺点，与气相色谱法相比，有自己的长处和优势互补。

的缺点的高性能液相色谱法“列效果。从喷射器到检测器上，在除了比支柱死空间（喷射器，柱接头，连接管和检测器单元等）的任何其他的类型，如果流动相流量的变化在任何要被分离和滞留的物质的扩散会导致扩大的峰，柱效降低显著高性能液相色谱检测器的灵敏度是小于在气相色谱仪中。

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4.气相色谱定量分析方法有哪些

气相色谱定量检测一般就两种，一个是外标法，一个是内标法，对于没有标准物质的，就只能靠面积归一法粗略定量。

外标和内标百度上有很多介绍，这里跟你讲一下对于没有标准物质的中间体该怎么通过气相色谱定量。

1.首先，要通过重结晶、过柱子、吸附等等方法先获得尽可能纯的产物；

2.然后烘干至恒重，注意要把结晶水也烘掉；

3.烘干以后，根据产物合成、纯化过程投加的各种物料，用气相色谱测残留溶剂，尽可能测全、测准；

4.测煅烧残渣：800℃在马弗炉里烧半个小时以上，测一下煅烧残渣，这些可能是夹杂在产物中的无机盐；

5.测水分，用溶剂把产物溶解掉，用微量水分测定方法测定产物中的水分，注意要扣除溶剂的空白值；

6.气相色谱检测产物：先通过调节分流比、汽化温度、柱温等，确认产物峰上没有毛刺或者坎肩峰；调检测条件，选一个峰形最好的条件，面积归一法定量；

7.计算：先扣除前面检测出来的残留溶剂、煅烧残渣和水分的含量，再乘以面积归一法的面积百分含量。

这样相对来说是比较准的定量方法了，面积百分含量越高的且其他残留越低的，定量越准。