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首页 » 生活常识 » 薄层色谱板都显色方法(薄层色谱显色规律是什么)

薄层色谱板都显色方法(薄层色谱显色规律是什么)

分类:生活常识 日期:2022-09-14 18:37 浏览:28 次

1.薄层色谱显色规律是什么

薄层色谱的显色要根据待分析成分的性质来定,具体分为几大类:

1、待分析成分本身具有紫外吸收,在紫外光灯下有明显特殊颜色的荧光。如当归的鉴别,点样后的薄层色谱板在展开后,取出,晾干,置于紫外光灯下(365nm)下检视。

2、待分析成分颜色不明显,需要喷显色剂才可以检视出斑点,还可以置于紫外光灯下检视。如黄芪的鉴别,薄层色谱板在展开后,取出,晾干,10%的硫酸乙醇溶液喷雾后,在105摄氏度加热约5min,供试品图谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同的棕褐色斑点;置紫外光灯(365nm)下检视,显相同的橙色斑点。

3、待分析成分的颜色很浅,可以喷显色剂显色后,再检视。如木香的鉴别,薄层色谱板在展开后,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,在105摄氏度加热5min,再检视。

4、待分析成分的颜色很深,展开后晾干,斑点的颜色较明显,易直接检视。但这种情况较少。

注:显色中以上1和3情况应用较多。薄层板在展开后多需要喷显色剂,显色剂的选择要根据待分析成分的性质来定,比如生物碱类多用改良碘化铋钾做显色剂,但麻黄碱而又用茚三酮为显色剂,蒽醌类成分喷稀NaOH做显色剂等等,在喷显色剂时不宜喷得太多,喷得雾滴不要太大,否则斑点显色不好而不易检视,多总结即可在实验操作应用。另外,紫外光灯下检视的波长有254nm和365nm,但一般365nm应用较多。

2.薄层色谱的显示定位方法有哪些

a 光学检出法

a自然光(400~800nm)

b紫外光(254nm或365nm)

c荧光一些化合物吸收了较短波长的光,在瞬间发射出比照射光波长更长的光,而在纸或薄层上显出不同颜色的荧光斑点(灵敏度高、专属性高)

b 蒸汽显色法

显色

多数有机化合物吸附碘蒸气后显示不同程度的黄褐色斑点,这种反应有可逆及不可逆两种情况,前者在离开碘蒸气后,黄褐色斑点逐渐消退,并且不会改变化合物的性质,且灵敏度也很高,故是定位时常用的方法;后者是由于化合物被碘蒸气氧化、脱氢增强了共轭体系,因此在紫外光下可以发出强烈而稳定的荧光,对定性及定量都非常有利,但是制备薄层时要注意被分离的化合物是否改变了原来的性质。

c 物理显色法

用紫外照射分离后的纸或薄层后,使化合物产生光加成,光分解、光氧化还原及光异构等光化学反应,导致物质结构发生某些变化,如形成荧光发射功能团。发生荧光增强或淬灭及荧光物质的激发或发射波长发生移动等现象,从而提高了分析的灵敏度和选择性。

d 试剂显色法

广泛应用的定位方法。用于纸色谱的显色剂一般都适用于薄层色谱,还有防腐剂的显色剂不适合用于纸色谱及含有有机黏合剂薄层的显色,又时喷显色剂后续加热,这也不是用于纸色谱。

显色方法a喷雾显色:显色剂溶液以气溶胶的形式均匀的喷洒在纸和薄层。b 浸渍显色:挥去展开剂的薄层板,垂直的插入盛有展开剂的浸渍槽中,设定浸板及抽出速度和规定在显色剂中浸渍的时间。

显色试剂

a 通用显色剂硫酸溶液(硫酸:水 1:1,硫酸:乙醇1:1)、0.5%碘的氯仿溶液、中性0.05%高锰酸钾溶液、碱性高锰酸钾溶液(还原性化合物在淡红色背景上显黄色斑点)

b 专属显色剂

3.常用的tlc显色方法,显色剂有哪些

TLC 显色试剂的选择 显色剂可以分成两大类:一类是检查一般有机化合物的通用显色 剂;另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。

通用显色剂 硫酸 常用的有四种溶液:硫酸- 水(1:1) 溶液;硫酸- 甲醇或乙醇(1:1) 溶液;1.5mol/L 硫酸溶液与0.5-1.5mol/L 硫酸铵溶液,喷后110 ℃烤15min ,不同有机 化合物显不同颜色。0.5 %碘的氯仿溶液 对很多化合物显黄棕色。

中性0.05 %高锰酸钾溶液 易还原性化合物在淡红背景上显黄色。碱性高锰酸钾试剂 还原性化合物在淡红色背景上显黄色。

溶液 I :1% 高锰酸钾溶液;溶液 II :5% 碳酸钠溶液;溶液 I 和溶液 II 等量混合应用。酸性高锰酸钾试剂 喷1.6% 高锰酸钾浓硫酸溶液( 溶解时注意防止爆炸) ,喷 后薄层于180 o C 加热15 ~20min 。

酸性重铬酸钾试剂 喷5% 重铬酸钾浓硫酸溶液,必要时150 o C 烤薄层。5% 磷钼酸乙醇溶液喷后120 o C 烘烤,还原性化合物显蓝色,再用氨气薰,则背景变 为无色。

专属性显色剂 由于化合物种类繁多,因此专属性显色剂也是很多的,现将在各类化合物中 最常用的显色剂列举如下:(1) 烃类 ①硝酸银/ 过氧化氢 检出物:卤代烃类 溶液:硝酸银0.1g 溶于水1ml ,加2- 苯氧基乙醇 l00ml ,用丙酮稀释至200ml ,再加30% 过氧化氢1 滴。方法:喷后置未过滤的紫外光下照射;结果:斑点呈暗黑色。

②荧光素/ 溴 检出物:不饱和烃 溶液:I .荧光素0.1g 溶于乙醇100ml ;II .5% 溴的四氯化碳溶液。方法:先喷(I) ,然后置含溴蒸气容器内,荧光素转变为四溴荧光素( 曙红) ,荧光 消失,不饱和烃斑点由于溴的加成,阻止生成曙红而保留荧光,多数不饱和烃在 粉红色背景上呈黄色。

③四氯邻苯二甲酸酐 检出物:芳香烃 溶液:2 %四氯邻苯二甲酸酐的丙酮与氯代苯(10:1) 的溶液。方法:喷后置紫外光下观察。

④甲醛/ 硫酸 检出物:多环芳烃 溶液:37% 甲醛溶液0.2ml 溶于浓硫酸 l0ml 。(2) 醇类3,5- 二硝基苯酰氯 检出物:醇类 溶液:I .2% 本品甲苯溶液;II .0.5% 氢氧化钠溶液;III .0.002% 罗丹明溶液。

方 法:先喷(I) ,在空气中干燥过夜,用蒸气薰2min ,将纸或薄层通过试液(II)30s ,喷水洗,趁湿通过(III)15s ,空气干燥,紫外灯下观察。硝酸铈铵 检出物:醇类 溶液:I .1% 硝酸铈铵的0.2mol/L 硝酸溶液;II . N,N- 二甲基- 对苯二胺盐酸盐1.5g 溶于甲醇、水与乙酸(128ml+25ml+1.5ml) 混合液中,用前将(I) 与(II) 等量混合。

喷板后于105 o C 加热5min 。

4.薄层色谱显色规律是什么

薄层色谱的显色要根据待分析成分的性质来定,具体分为几大类:1、待分析成分本身具有紫外吸收,在紫外光灯下有明显特殊颜色的荧光。

如当归的鉴别,点样后的薄层色谱板在展开后,取出,晾干,置于紫外光灯下(365nm)下检视。2、待分析成分颜色不明显,需要喷显色剂才可以检视出斑点,还可以置于紫外光灯下检视。

如黄芪的鉴别,薄层色谱板在展开后,取出,晾干,10%的硫酸乙醇溶液喷雾后,在105摄氏度加热约5min,供试品图谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同的棕褐色斑点;置紫外光灯(365nm)下检视,显相同的橙色斑点。3、待分析成分的颜色很浅,可以喷显色剂显色后,再检视。

如木香的鉴别,薄层色谱板在展开后,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,在105摄氏度加热5min,再检视。4、待分析成分的颜色很深,展开后晾干,斑点的颜色较明显,易直接检视。

但这种情况较少。注:显色中以上1和3情况应用较多。

薄层板在展开后多需要喷显色剂,显色剂的选择要根据待分析成分的性质来定,比如生物碱类多用改良碘化铋钾做显色剂,但麻黄碱而又用茚三酮为显色剂,蒽醌类成分喷稀NaOH做显色剂等等,在喷显色剂时不宜喷得太多,喷得雾滴不要太大,否则斑点显色不好而不易检视,多总结即可在实验操作应用。另外,紫外光灯下检视的波长有254nm和365nm,但一般365nm应用较多。

薄层色谱板都有哪些显色方法

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