保存生物材料方法(保藏菌种的方法)

1.保藏菌种的方法有哪些

1、传代培养保藏法：包括又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等，培养后于4-6℃冰箱内保存。

2、液体石蜡覆盖保藏法：液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间。

3、载体保藏法：载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法。

4、寄主保藏法：寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物。

5、冷冻干燥保藏法：先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥），其中真空冷冻干燥法最常见。

扩展资料

菌种保藏的原理：

菌种保藏有多种方法，其原理大多大同小异，主要是运用一些方式尽量降低生物体内的代谢，达到延长生命，减少变异的目的。通常采用的方法为低温、缺氧、干燥。

低温主要对菌种产生两方面的影响，首先，较低的温度可以减缓机体细胞的酶活，降低新陈代谢，达到保藏菌种的目的。其次，低温同时会导致菌体诱发菌丝自溶机制，如果降温过程失误，同样会造成机体的机械损伤和溶质损伤。

参考资料来源：百度百科——菌种保藏

2.生物保鲜技术有哪些

直接用微生物菌体保鲜 目前人们也有直接用微生物菌体对食品的保鲜防腐进行研究。例如刘绍军等人[9]用啤酒酵母菌对草莓进行了保鲜研究。结果啤酒酵母菌对草莓的后熟起到推迟作用而减轻草莓腐烂程度。欧体库尔・玛合木提等人[10]从葡萄表面分离到一株链霉菌H2用于新疆甜瓜的防腐保鲜。在绿茶中掺入嫌气性蜡样芽孢杆菌经低温处理对茶叶的保鲜，该技术已获得了中国发明专利（专利号CN1145177A）。国外对一种有益真菌Trichodermaharzanium进行了新西兰猕猴桃的防霉研究。结果表明，用此方法保护的6000只新西兰猕猴桃不受霉菌侵染达1a之久。而没被处理的猕猴桃有一半被Botrytiscinerea霉菌破坏

多糖类物质保鲜细菌、真菌和蓝藻类产生的微生物多糖，因其安全无毒、理化性质独特等而倍受关注。微生物大量产生的多糖，易与菌体分离，可通过深层发酵实现工业化生产。微生物多糖已作为成膜剂、保鲜剂应用于食品、制药等多个领域。例如普鲁兰多糖因其无味、无嗅、无毒、可食用，良好的成膜性，以及优良的阻氧效果，可用于食品保鲜作用。从虾、蟹、昆虫等节肢动物的外壳及真菌、藻类等低等植物细胞壁中的早壳素经酸化所得的含氮多糖类物质即壳聚糖，因其具有良好的成膜性与抑菌作用而应用于果蔬的保鲜。对柑橘、草莓、苹果、猕猴桃、黄瓜、青椒、番茄的保鲜试验可知[1]：只需017%~2%的壳聚糖的溶液喷洒在果蔬的表面即可在果实表面形成一层薄膜，可阻止果实吸收O2与CO2的排出，从而延缓果实的熟化，达到保鲜的目的

3.常用的菌种保存方法有哪些

菌种保藏是食用菌产业的一项基础工作，是确保野生种质资源基因留存和现有生产用种遗传性能相对稳定的必要手段。

菌种保藏的方法多种多样，有的虽然保藏效果好，但投资高或操作繁杂。在生产实践中，更需要设备投入少，能保障菌种不死亡、不污染、最大限度地保持优良种性的简便方法，如斜面低温短期保藏和自然基质较长期保藏相结合的方法。

一般而言，对母种进行长期保存，对原种进行短期保存。须保证优良菌种的性状和活力不发生变异，不死亡，不被污染，确保其纯度。

因此，保存方法应具备取材容易、操作方便、菌种不易退化、长期保存不污染杂菌等优点。常用的菌种保存方法如下：（一）斜面低温保藏 该法的优点是保藏方便且所占空间较小。

具体做法是：菌丝长满斜面后，放在0~5℃保存。以后每隔一定时间（2~3个月）转管一次。

转管保存不能长期用PDA培养基，否则种性易退化，灰树花降解木质纤维素的能力减弱。因此隔一定时间（1年左右）须把菌种转接到木屑培养基上复壮，之后挑选健壮无污染的菌丝再转回PDA培养基保存。

在长期保存过程中，要防棉塞受潮滋生杂菌。菌种试管口最好用蜡烫封，以防培养基内水分过快蒸发。

增加琼脂用量（2.5%~3%）可减缓水分蒸发。还要防止菌种管上的标签脱落而造成种系混杂。

斜面低温保藏方法简便易行，能随时观察保藏菌株的活力和纯度，一旦染杂，肉眼能及时发现。（二）自然基质保藏 此法是根据灰树花的特性，利用自然基质保藏其菌种的方法。

灰树花是木腐菌，可以采用以木屑为主料的培养基。自然基质营养全面，且大部为缓释养分，不易产生营养过剩或饥饿；其次，培养基理化性状好，可吸收或缓冲菌丝代谢出的有害物质，水分与通气协调平衡，部分菌丝扎入基质内生长，不裸露于空气中，菌丝呼吸强度低，生命力强。

1.原料与配方 粗、细木屑比例适当，采用板栗树木屑最佳，粗木屑粒径为2毫米左右，细木屑为一般圆盘锯屑，粗、细的比例为1∶2，添加干木屑重量20%的麸皮和1%的糖，含水率为60%左右。这样的基质通气性好，营养丰富且供菌丝分解利用的时间长，长到基质内部的菌丝比包裹在基质外部暴露于空气中的菌丝耐受性强。

不同粒径的基质比例适当，还能协调气与水的矛盾。粗粒过多，架空菌丝多；细粒过多，透气性差，菌丝生长慢。

应用配方如下：栗木屑78%，麸皮20%，石膏1%，蔗糖1%，水65%配料，装入较粗大的试管中，装料量为试管的1/3~1/2,1.5千克/厘米2灭菌1.5小时。冷却后，接入需保藏的菌种，在28℃下培养，待菌丝长满木屑培养基时取出换上无菌橡皮塞，在0~5℃冰箱内保藏1~2年转管一次。

2.容器与装量 采用容量250毫升的葡萄糖玻璃瓶，清洗洁净，装量一般不超过玻璃瓶容量的3/5，填料不能过满，瓶壁所残留的颗粒须擦拭干净，否则保藏的菌种易引起污染。3.灭菌和冷藏 灭菌时若采用棉塞封口，基质表层易失水，接种成活率低，即使菌丝复活，生长也很缓慢，所以最好采用聚丙烯膜封口，接种后换用无菌棉塞培养，待菌丝长满后再换成有孔灭菌胶塞冰箱保藏。

用上述方法保藏的菌种经3年贮放后，接出成活率均达90%以上，出菇验证产量及子实体形态特征均无明显变化。因此，自然基质保藏法具有保存期长，菌种遗传性能相对稳定的特点。

（三）木粒PDA斜面保藏 灰树花在自然状态下易发生于栗树根部，这说明其营养需求较为特殊。根据灰树花这种习性，在PDA基础上添加适量的栗树木粒制成母种培养基。

在多年的使用中发现，用该培养基培养的母种生长势好，在转接原种时，适应能力强，萌发定植快；用作菌种保藏基质时，保藏时间长，并能很好保持菌种的优良性状。1.木粒PDA的制作 选取栗树边材，加工成0.3~0.5厘米的颗粒，及时烘干或晒干备用。

称取葡萄糖10克，KH2PO41克，1溶解于1升清水中配制成营养液。将营养液倒入盛有木粒的小铝锅中，营养液以完全浸没木粒为准。

煮沸10分钟，以加快木粒对营养液的吸收速度，起锅静置30分钟让木粒吸足营养液。捞出木粒，沥掉表面的水，装入试管，装量为试管长的1/6，最多不得超过试管长的1/5，否则在摆制斜面时，不易使木粒均匀分散于斜面的表面上。

选取新鲜的马铃薯，去皮并切成薄片，称取200克放入小铝锅中，加入1升清水，文火煮沸30分，趁热过滤取汁，并补足1升的体积。称取琼脂20克，葡萄糖20克，KH2PO4 2克，MgSO47H2O 2克。

先将琼脂剪碎，加入到马铃薯滤液中，继续用文火加热，使琼脂溶化。待琼脂完全溶化后，加入称好的其他3种营养成分，搅拌使这些物质溶解均匀，趁热装入已装有木粒的试管中，装至试管长的1/3处，塞上棉塞。

在0.8~1千克/厘米2蒸气压下灭菌40分，待气压降至0时，开盖取出，趁热轻轻抖拍试管，使木粒分散后即可摆制斜面，并使木粒呈半裸状分布于斜面上，待凝固后便制成了木粒PDA培养基。2.生长及保藏效果 木粒PDA斜面上培养的灰树花母种，菌丝生长迅速、良好，12天即可长满试管，但菌丝的后期生长势更为粗壮、浓密，后劲足。

转接原种时，菌种适应力强，定植快。这表明，灰树花菌丝的生长速度、生长势不仅取决于本身的遗。

4.微生物检验材料的保存方法是什么

微生物检验材料的保存方法如下：（1）液体样品。

黏液、渗出物、胆汁、血液等，最好收集 在灭菌的小试管或青霉素瓶中，密封后用纸或棉花包裹，装人较 大的容器中，再装瓶（或盒）送检。（2）做棉试蘸取的鼻液、浓汁、粪便等样品。

应将每支棉 试剪断或烧断，投入灭菌试管内，立即密封管口，包装送检。（3）实质脏器。

在短时间内（夏季不超过20小时，冬季不 超过2天）能送到检验单位的，可将样品的容器放在装有冰决的 保温瓶内送检。短时间不能送到的，供细菌检查的，放于灭菌流 动石蜡或灭菌的甘油生理盐水中保存；供病毒检查的，放 于灭菌的50%甘油生理盐水中保存。

5.储存食物的方法有哪些

食物种类繁多，性质各异，适应的环境各不相同。因此储存食物首先要熟悉各种食物的特点.了解影响食物变化的原因，采取适当的存储方法。只有这样才能有效保持食物的外观（形状、色泽）和内在的质量（质地、营养成分），防止烹饪食物发生腐烂、腐败、变质等情况，减少不必要的损失，避免浪费。

一、低温储存法

低温储存法是储存烹饪食物级常用的方法。其主要原理是通过低温有效地抑制微生物的生长和繁殖，降低酶的活性，减弱食物内的化学反应，较好的保持食品原有的风味和营养价值。

低温储存按其温度的不同可分为冷藏法和冷冻法，冷藏的温度是在冰点以上。

采用冷藏的食物主要有蔬菜、鲜肉、鲜鱼、水果、奶制品以及熟制品和半成品等食物。冷冻法是将食物在低于冰点的环境中冻结，适用于储存动物性食物等。冷冻法可以使食物保存较长的时间不变质。但是长时间存放，虽然食物的质且变化不大.但水分减少，其背养价值降低，吃起来口感也不好。另外，两种以上食物存放在同一个冷冻箱内时，要用无毒害的食品袋密封隔离。预防气味相互污染.同时也可减少食物水分的流失。

二、高温储存法

高温储存法是餐饮业储存食物经常使用的方法，因为微生物对高温的承受能力弱，当温度提高时可有效地杀灭微生物.并破坏酶的活性.可防止微生物对食物的影响，达到储存食物的目的。其方法是先将食物用开水煮透或蒸透（达到100度以上的高温），取出或仍用原汤泡上.放在凉爽通风的地方不搅动，防止食物重新被污染。采用此方法可使食物在较长的时间内不变质。这种方法适用于保存动物性食物的成品和半成品以及水发干货类等食物。

三、通风储存法

通风储存法主要适用于保存粮食、干货食物和需要风干的食物.它们的特点都是怕霉、怕捂。例如米、面、花生、蔬菜等食物，在储存的时候都需要通风.这样可使霉菌不易生长，保持食物的原有成分，减少霉变。

四、腌、渍、酱、泡储存法

此种方法一般是用盐、糖、醋、酱和五香料，按照一定的比例方法加人食物内，使食物吸收一定的浓度。来抑制微生物的生长.达到长期保存食物的目的。例如：腌菜制品有咸萝卜条、咸豆角、糖醋蒜等。酱菜制品有酱五香大头菜、酱黄瓜、酱八宝菜等。泡菜制品有泡洋白菜、泡辣椒、泡茄子等。

通过腌、渍、酱、泡等处理后的食物，一般营养价值会降低，因为食物中一部分维生素、无机盐被破坏和损失.特别是动物性食物的纤维肌会变硬.不易被人体吸收消化。但是加工烹调后香味浓郁，口味极好。这种储存食物的方法简单易行，在饮食行业中得到广泛应用。

五、烟熏储存法

烟熏是用锯未、松拍枝等材料，在不完全燃烧的情况下所产生的烟气来熏烤食品的一种方法，经烟熏后的食物不但减少了食物内部的水分，而且烟气中有杀菌和防腐作用的木焦油、杂酚油等附在食物的表面上.能防止细菌的生长，从而达到防腐储存的作用，一般常见的熏制品有熏鱼、熏鸡、熏肉等。

六、真空密封保存方法

真空密封保存方法是使食物在真空的状态下，不与空气中的微生物接触.进行密封保存食物的一种方法，如罐装制品、真空包装制品等。此方法适用于多种食物的保存。

随着科学技术的不断发展，储存食物的方法也越来越多，如核辐射储存法、气调

法等都是比较先进的方法，它们的主要原理就是控制或杀死食物中生长的微生物，延缓原料内部组织新陈代谢，从而延长食物的保存时间，提高储存的质量，达到保存的目的。

6.如何保存基因材料

基因重组的材料是基因片段（含有目的基因）。那么，这些用于基因重组的基因片段是怎样保存的呢？生命体的细胞中含有该生物遗传的全部密码。为了改造某一生物，把含有目的基因的片段导入该生物的细胞中去，才能培育出带有外源基因的转基因生物（动物、植物或微生物）。问题是这个含有外源基因的片段，不是随时随地可以觅到的，必须事先保存在一个地方，这就是基因文库。它是存放基因的“仓库”。

生物的全部基因就在细胞内的DNA上，这是一条很长的链。指挥生物的一切秘密全在上面。遗传工程科学家为了基因重组方便，就采取先把一种生物细胞中的全部DNA或染色体上的DNA的所有片段，随机地连接到基因载体上，然后移植到宿主细胞中进行增殖，形成各个片段的无性繁殖系。这样，该生物的全部基因片段就在宿主细胞内一个不留地全部复制出来。

这好比拍电影，先拍分镜头（相当于基因片段），拍好全部镜头后进行剪接，配上录音，就是一部电影了。有了这个电影片子，就可以复制出许许多多相同内容的电影。

从70年代起，科学家已建立了大肠杆菌、酵母菌、果蝇、鸡、兔以及大豆、水稻等多种生物的基因文库。我们要取这些生物的任何一个基因片段进行重组，都非常容易了。

用于侦破的基因指纹

大家知道，在现代侦破手段中，利用指纹寻找罪犯，捉拿凶手，是非常有效的。这是因为世界上几乎没有两个人的指纹是相同的。不同的指纹，实际就代表不同的人。只要在自己的指头上涂以油墨或者印泥，捺在白纸上就能印出清楚的指纹。因此，在犯罪现场寻觅指纹是极其重要的任务。

现在还有利用基因指纹作为侦破手段的。基因指纹是遗传学上的概念。原来，人的基因虽然大体上都是一致的，但是仍有不同，而且同样找不出两个人会有相同的基因（双胞胎也有微小区别）。根据基因密码，经过特殊处理，也会显示出如同条形码那样的纹形——黑白相间，这就是基因指纹。

现代科学技术能从一滴血、一根头发或者一口唾液中发现基因指纹。如果是一个杀人犯，他在与被害者搏斗过程中，很可能弄破自己的皮肤而留下极少的血迹。刑侦人员从血迹中就可以找到基因指纹。当刑侦人员从疑犯身上获得基因指纹，如与现场血迹的基因指纹一致，那么疑犯就成了百分之百的凶手。至于对强奸犯的侦破，利用精液获得基因指纹，在国外已经成了常用的侦破手段。

基因指纹用于现代侦破虽然历史还很短，但已经受到特别的重视。

7.专利申请对生物材料保藏有什么规定

专利申请涉及从未公开过的生物材料（如质粒、细菌、真菌、藻类、动植物细胞系等）的，须在专利申请同时或申请日起四个月内向国家知识产权局提交其认可单位出具的生物材料保藏和存活证明。

不需要保藏的生物材料：在国内外商业上公众能买到的生物材料；各国专利局或国际专利组织指定的用于专利程序的保藏机构保藏的生物材料，在向我国提交的专利申请享有的优先权日或申请日前已在专利公告中公布或已授权的，均不用保藏。

需要保藏的生物材料：个人或单位持有的，在非用于专利程序保藏机构保藏的，并对公众不公开发放的，或在申请日（优先权日）前公众不能得到的，如通过筛选、突变、重组DNA等手段新创制的生物材料，均要求保藏。