evg染色(血涂片的血涂片)
1.血涂片的血涂片
1） 玻片的清洗：新玻片常有游离碱质，因此应用清洗液或10%盐酸浸泡24小时，然后再彻底清洗。用过的玻片可放入适量肥皂水或合成洗涤剂的清水中煮沸20分钟，再用热水将肥皂和血膜洗去，用自来水反复冲洗，必要时再置95%乙醇中浸泡1小时，然后擦干或烤干备用。使用玻片时只能手持玻片边缘，切勿触及玻片表面；，以保持玻片清洁，干燥，中性、无油腻。
2） 细胞染色对氢离子浓度十分敏感，在染色过程中玻片必须化学清洁，配制瑞氏染液必须用优质甲醇，稀释染液必须用缓冲液，冲洗用水应近中性，否则各种细胞染色反应异常，致使细胞的识别困难，甚至造成错误。
3） 一张良好的血片，要求厚薄适宜，头体尾分明，分布均匀，边缘整齐，两侧留有空隙。血片制好后最好立即固定染色，以免细胞溶解和发生退行性变。
4） 血膜未干透，细胞尚未牢固附在玻片上，在染色过程中容易脱落，因此血膜必需充分干燥.
5） 染色时间与染液浓度，室温高低，细胞多少有关.染液越淡，室温越低，细胞越多，所需染色时间越长或应适当增加染液量，因此染色时间应视具体情况而定.特别是更换新染料时必须经试染，摸索最佳染色条件.
6） 染液不可过少，以防蒸发干燥染料沉着于血片上难冲洗干净.
7） 冲洗时应用流水将染液冲去.不能先倒掉染液，以免染料沉着于血片上.
8） 染色过深可用甲醇或酒精适当脱色，最好不复染，必须复染时，可将染液先稀释好再复染.
9） 染色时应注意保护血膜尾部细胞，不能划掉.因为体积较大细胞常在此处出现.
2.如何给鹿角染色
植鞣革染色的效果，因染料不同、手法不同、使用时间、保养方法不同而异。
【酒精染料】是最便宜易得的手工皮革染料。优点是水溶性，可以随意混合调色（尽量同品牌内），可加水稀释调节颜色深浅，颜色选择比较多，使用方法比较随意：擦染、浸染、喷染都可以。
缺点是染后会使皮革变得干硬，需要额外补充油脂。这里重点说液体油染。
虽然用液体油性染料手工染色的话很难染得非常均匀没有色差，但那种有深有浅的斑驳感觉非常适合表现手工制品质朴又富于变化的气质。有天然砂石磨碎的，有经上色再烧结的，正规加工的染色剂是无毒害的。
一般，装饰用彩砂经过精选加工而成，不含任何染料，具有无毒、无味、无污染、抗腐蚀、耐酸碱、抗暴晒、不变色等特点。只要是购买正规厂家的合格产品都没有毒害。
在被染色的区域擦上风油精慢慢揉开就好了。注意这样处理完之后，用洗洁精或者牙膏再洗一下，建议不要用刷子刷，稍微洗洗就好了。
处理后的包包用毛巾擦干表面上的水分，然后有条件最好是再擦点那种皮具专门用的保护液之类的，因为用完风油精之后其实能够明显的感觉到那块区域没有以前那么亮了，可能是清洁过度。用漂洗液！超市里很多卖的，产品包装上有使用说明！一般泡在混合漂洗液的水里面20分钟在用普通洗衣粉洗洗就OK了！彩漂液贵不如白漂液效果好。
3.ATP酶染色的具体步骤与注意事项?我最近要做肌肉组织切片的ATP
你所描述的问题很可能是溶液的pH值的问题，染色的结果与pH密切相关，附区分骨骼肌纤维类型的ATP酶组织化学方法： 显示肌球蛋白的ATP，肌纤维I、II型。
1。 组织固定于10%~15%中性福尔马林。
2。 水洗后入0。
88庶糖水溶液，或1%阿拉伯胶（100ml加30g庶糖）浸2~3d。 3。
冰冻切片10um，分别放入三种不同PH值的预孵育液内，室温下10min。PH分别为10。
4、4。65和4。
3（准确）。 4。
入巴比妥钠液（PH9。4）1min。
5。 入孵育液30min,37℃。
6。 2%氯化钴（用前配制）3min 7。
蒸馏水洗3次1min/次 8。 1%硫化胺（用时配制）10min 9。
流水冲洗不少于10min。 10。
各级酒精脱水、透明、封片。 预孵育液： 1。
巴比妥钠PH10。4，取巴比妥钠4。
12g，氯化钠1。998g，加蒸馏水1000ml。
2。 醋酸缓冲液PH4。
65,A液：醋酸钠13。5g加蒸馏水至500ml。
B液：冰醋酸6ml蒸馏水至500ml。 取A液24ml,B液26ml混合至PH4。
65。 3。
醋酸缓冲液PH4。3。
用2液调PH至4。3。
孵育液： 取巴比妥钠液（PH9。4）10ml加三磷酸腺甘钠盐20mg。
结果： PH值 纤 维 类 型 I IIA IIB IIC 10。 4 灰或白 黑 黑 黑 4。
65 黑 白 灰或黑 黑 4。3 黑 白 白或灰 深灰 ----------------------------------------------- 巴比妥钠能影响Ca2+-ATPase活性，对实验最后一步硫化胺沉淀显色很重要。
另外，蔗糖溶液是为了保持更好的渗透压，让细胞原始形状保持更好，PBS应该不如蔗糖好。
4.免疫组化实验染色的注意事项及影响因素有哪些
免疫组化染色影响因素
影响免疫组化染色质量的因素有很多，在实验中应注意组织的取材和固定，选择质量好的商品化抗体，恰当地选择和使用封闭和抗原修复手段，严格的技术操作和对照等。
1。假阴性反应可发生在：
1） 组织内待测抗原已被分解破坏，或抗原含量过低；
2） 抗原被遮盖，多由于醛类固定剂的使用，使组织中的大分子蛋白借醛键形成交联而遮盖待检抗原；
3） 抗体质量不佳或稀释度不当；
4） 技术操作失误等。
2.假阳性反应可发生在：
1） 抗体与非待检抗原发生交叉反应，在使用多克隆抗体时易出现；
2） 组织对抗体的非特异性吸附，特别是在有大片组织坏死或组织中有较多富于蛋白的液体时容易发生；
3） 内源性过氧化酶的作用，在脾脏、骨髓及一些炎性病变组织的染色中易出现；内源性碱性磷酸酶的作用，特别是肠黏膜上皮和肾近曲小管的刷状缘有高浓度的碱性磷酸酶，若处理不彻底，易出现假阳性结果；
4） 判断失误，将肿瘤组织中残留的正常组织的免疫组织化学阳性信号误认为是肿瘤的染色反应；
5） 当肿瘤浸润破坏正常组织时，使被破坏的正常细胞胞浆内的可溶性蛋白释放，后者被肿瘤细胞非特异吸附或吞噬，使瘤细胞出现该种抗原的阳性反应；⑥外源性和内源性色素的干扰。
5.简单染色发中各种步骤的注意事项是什么
革兰染色过程所用四种不同溶液和作用： 1、碱性染料：这在简单染色中已讨论过，此处用结晶紫. 2、媒染剂：其作用是增强染料与细菌的亲和力，更好地加强染料与细胞的结合.常用的媒染剂是碘液. 3、脱色剂：帮助染料从被染色的细胞中脱色.利用细菌对染料脱色的难易程度不同，而将细菌加以区分.革兰阳性细菌不易被脱色剂脱色，而革兰阴性细菌则易被脱色.常用的脱色剂是丙酮或乙醇，这里所用的是95%的乙醇. 4、复染液：也是一种碱性染料，目的是使脱色的细菌重新染上另一种颜色，以便与未脱色菌进行比较.这里用的是蕃红花红溶液. 革兰染色的实验步骤 1.涂片：左手持菌液试管，右手持接种环，用接种环从试管培养液中取一环菌，于载玻片中央涂成薄层（事先在背面做好标记圆圈）即可，或先滴一小滴无菌水于载玻片中央，用接种环从斜面上挑出少许，与载玻片上的水滴混合均匀，涂成一薄层. 拔或塞试管塞时，应将试管口通过火焰略加烧灼，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌. 2.干燥：涂片后在室温下自然干燥，也可在酒精灯上略加温，使之迅速干燥，但勿靠近火焰. 3.固定：常用高温进行固定.即手持载玻片一端，标本面朝上，在灯的火焰外侧快速来回移动3~4次，共约3~4秒.要求玻片温度不超过60℃，以玻片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜，放置待冷后染色. 固定的目的是： ① 杀死微生物，固定其细胞结构； ② 保证菌体能牢固地粘附在载玻片上，以免水洗时被水冲掉； ③ 改变菌体对染料的通透性，一般死细胞原生质容易着色. 4.染色：将固定好的涂片放于报纸上，每次滴加一滴染液进行染色. 注意：乙醇脱色时滴加乙醇至流出液为无色立即进行水洗； 蕃红复染由于时间较长，应在染液干燥前补加染液； 镜检时吸水注意不要擦标本. 革兰染色的实验现象 如果将细菌做革兰染色，凡染后菌体呈蓝紫色的，称为“革兰阳性菌”；菌体是伊红色，称“革兰阴性菌”.无论阳性菌还是阴性菌，都有杆菌和球菌.葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌是临床最为常见的病原菌，葡萄球菌属于革兰阳性菌，大肠杆菌属于革兰阴性菌中的肠杆菌科，除大肠杆菌以外，临床较常见的肠杆菌科细菌还有变形杆菌属，沙门菌属、克霉白菌属；铜绿假单胞菌是临床常见的较耐药革兰阴性杆菌.。
6.革兰氏染色的注意事项
用途：用于细菌革兰氏染色实验
成分：
结晶紫染色液（每瓶）：
结晶紫 0. 1g
95%乙醇 2mL
1%草酸铵水溶液 8mL
革兰氏碘液（每瓶）：
碘 0.033g
碘化钾 0.067g
蒸馏水 10mL
脱色酒精（每瓶）：
95%酒精 10mL
沙黄复染液（每瓶）：
沙黄 0.025g
95%乙醇 1mL
蒸馏水 9mL
使用方法：
1.将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染色液。染1min，水洗。
2.用空瓶装所需的革兰氏碘液，临用时滴加革兰氏碘液，作用1min。水洗。。用剩碘液应及时再装回棕色玻璃瓶中。
3.滴加脱色酒精，约30s；或将脱色酒精滴满整个涂片，立即倾去，再用95%酒精滴满整个
涂片，脱色10s。
4.水洗，滴加沙黄复染液，复染1min，水洗，待干，镜检。
结果：
革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
贮存：常温避光（可放回原包装盒）
规格：10ml*4瓶/盒
7.普通光学显微镜的使用及细菌的简单染色法实验的注意事项有哪些
由于细菌体积小且透明，在活体细胞内又含有大量的水分，因此，对光线的吸收和反射与水溶液相差不大。
当把细菌悬浮在水滴内，放在显微镜下观察时，由于与周围背景没有显著的明暗差，难于看清它们的形状，更谈不上识别其细微结构。而经过染色，就可借助颜色的反衬作用比较清楚地看到菌体形态，亦即菌体表面及内部结构着色与背景形成鲜明对比，这样便可在下清晰地观察到微生物的形状和结构，而且还可以通过不同的染色反应来鉴别微生物的类型和区分死、活细菌等，因此，染色技术是观察细菌形态结构的重要手段。
