杂交授粉(玉米杂交授粉的操作步骤及注意事项)

1.玉米杂交授粉的操作步骤及注意事项

调节开花期

玉米由于单性花，在调节开花期方面，必须使母本的雌穗和父本的雄穗的花期一致。可用分期播种的方法调节父、母本的花期。

选株

父、母本均应选择生长健壮、无病虫害和具有本品种典型性状的植株，作为杂交对象。

套袋隔离

当母本植株的雌穗已经露出而没有伸出柱头以前，用牛皮纸袋套好雌穗。当母本雌穗开始抽出柱头时，要在当天用牛皮纸袋套在父本植株的雄穗上，雌、雄穗的纸袋，要用细绳或回形针扎紧，以免脱落。玉米杂交

采粉

从上述玉米的开花习性中可以知道，其雄穗在始花后的第2~4天内开花最多，进入盛花期，一天中开花最多的时间是上午8~10时，而此时花粉的生活力也最强；雌穗在始花后的第2~4天，处于盛花期，柱头已基本抽齐。因此，采粉时间应选择父、母本的盛花期、并选择上午8~10时进行采粉。采集花粉时，将父本雄穗稍稍下弯，轻轻抖动，用人工辅助授粉器盛接花粉、采粉时要防止其它品种的花粉混入。

人工辅助授粉器是用光滑的厚纸制成1个圆锥形的纸筒，用厚纸作纸盖盖住下口，另外用细铁丝网做成1个筛子，平放于低筒内。采集的花粉可通过筛子均匀授到柱头上。

授粉

授粉时，先取下雌穗上的纸袋，立即用人工辅助授粉器的下口对准雌穗的柱头，轻轻抖动授粉器，使花粉落在柱头上。

授粉后，仍用原来的纸袋将雌穗套好，但应在袋顶和穗顶之间留出一定的距离，以防止因果穗伸长而顶破纸袋。纸袋套好后，应在雌穗基部拴上纸牌（或塑料牌），写明杂交组合、授粉日期和操作者姓名等项内容。

收获

母本果穗成熟后，应连同纸牌（或塑料牌）一起单独收获，并单独保存，供来年播种检验杂交是否成功。

2.怎样进行杂交授粉

在进行杂交授粉时，应按照以下步骤进行： （1） 去雄和套袋在杂交授粉之前，为了防止母本自花授粉，首 先要把雄蕊全部拔掉。

一般花卉的雄蕊都比雌蕊成熟早，为了保险起 见，最好在花蕾全部展开前就把花瓣剥开，随着将雄蕊全部拔掉，也 可将花瓣一起拔掉，防止它们招蜂引蝶而造成天然杂交。 去雄后应立 即套上透明纸袋，让柱头、花柱和子房在袋内慢慢发育。

（2）花粉的采集和JC存杂交授粉都是在品种间进行的，不同品 种的父本和母本开花期有早有晚，因此需将父本的花粉事先采集下来 进行C存，待母本开花后再进行授粉。 花粉的寿命因花卉种类的不同而不同。

一般花卉的花粉粒在低温 干燥环境下能够保存很长时间，采粉时应当用新毛笔收集花粉，或者 连同花丝一起拔下来，收集到干净的玻璃器皿中，然后放入避光的冷 藏箱或冷箱的下层，保持5〜10ºC的低温和50%以下的相对湿度。 为 了防止花粉粒受潮，最好用细纱布包上一包氯化钙或变色硅胶等干燥 剂，放在装有花粉的器皿中，或将它们装入化学试验室用的干燥瓶 中，再放入冷藏箱，一般可C存1个月以上。

（3） 人工授粉当父本花药上的花粉粒颗颗显现，颜色变黄，母 本的柱头显出亮晶晶的黏液时，说明它们都已成熟，这时即可采集花 粉进行授粉。 如果雄蕊的花丝粗壮，花药较胖，可直接用镊子把它们 拔下来，打开母本上的纸袋，在柱头上轻轻涂抹。

如果雄蕊的花丝细 小而无法拔取，可用新毛笔把花粉掸到白纸或玻璃盘中，再用笔尖蘸 上花粉涂点在雌蕊的柱头上。 人工授粉在1天内应间隔进行2次，或者隔日重复授粉。

每次授 粉后仍用纸袋把花头套好，同时挂上写有父、母本品种名称和授粉日 期的标牌。待子房或花托开始膨大并结出幼果时，再把纸袋去掉。

3.植物体杂交注意事项

植物体细胞杂交（plant somatic hybridization），又称原生质体融合（Protoplast fusion ）是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有在脱去细胞壁成为原生质体后才能融合，所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。

说道植物细胞融合，它和动物细胞融合还是有很大差别的。

第一，前者因为有细胞壁，对融合有负面影响，首先要除壁变成原生质体，可以用纤维素酶和果胶酶除壁。

第二，后者除了要加必要的营养物质外，还要加血清保持环境稳定。

细胞融合方法主要有化学、生物和物理方法。一般学生实验室使用PEG（主要含有聚乙二醇）法融合。其优点是操作简单不需要特殊的设备。只需在去壁的细胞加入适量的PEG处理适当的时间，然后终止PEG的作用，然后在普通光学显微镜即可看到融合细胞。这种方法也有缺点，如不好控制PEG作用的时间，而且PEG对细胞也可能有害。

只有处理时间得当，细胞壁去除了才可能提高成活率。

优点：植物体细胞杂交是两种异源原生质体，在诱导剂诱发下相互接触，从而发生膜融合、胞质融合和核融合并形成杂种细胞，进一步发育成杂种植物体。通过细胞融合技术可以克服种、属以上职务有性杂交不亲和障碍，为广泛重组遗传物质开辟了新途径，也为携带外源遗传物质（信息）的大分子渗入细胞创造了条件，从而更进一步扩大了遗传物质的重组范围。

4.杂交制种时应注意哪些技术环节

为了配制数量多、质量好、成本低的杂交种子，除了要有高质量的、配套的亲本，还要有相应的生产条件和栽培管理措施，如安全隔离区、合理的父母本行比和调节好播种期以保证花期相遇等。

此外，在生长过程中还要严格掌握以下技术环节。（1） 去杂去劣为了保证制种质量，获得纯、优的杂交种子，在亲本繁殖区严格去杂的基础上，对制种区的亲本也要分期地严格进行去杂去劣。

尤其是当父本种子下一年要连用时，更应从严要求以保证杂交种质量。去杂去劣的时间，除在苗期结合定苗进行外，还应在抽穗开花前、收获后分别进行，必须把杂株在开花前拔除干净，以防杂株花粉的干扰。

（2}及时彻底去雄和人工辅助授粉母本去雄是整个制种工作的中心环节，是获得高质量杂交种子的关键。 去雄的要求是及时、彻底、干净。

及时，就是指雄花未散粉前即去除；彻底，是指全隔离区所有母本的雄穗（花）一个不漏地全部去除；干净，是要将母本的整个雄穗或所有雄蕊拔除，不得残留。目前，除高粱、水稻和部分玉米、油菜可以利用雄性不育特性简化去雄手续外，玉米、棉花等作物多数还是利用人工去雄的方法制种。

如果去雄不及时、彻底、干净，就很难保证杂交种子质量。去雄工作应有专人负责，按不同作物的开花习性，掌握好去雄时间，保证去雄质量。

去雄后的母本除刮风、昆虫等传粉外。为了提高结实率，增加产种量，必须进行若干次人工辅助授粉，也可采用一些特殊的措施，如对玉米剪苞叶、花丝，对水稻割苞叶、赶粉、喷赤霉素等来提高结实率。

目前，玉米制种时，全田授粉结束后，常把父本行砍掉，用做青伺，以防止父本自交系流失。第二年制种时，用繁殖田做父本，种子质量也好。