一、钠、钾的测定 (一)标本要求 血浆或全血钾比血清低0.2~0.5mmol/L,是因为血液凝固时血小板破裂释放出一部分K+。
因此,报告时必须注明是血清还是血浆。 测血钾时,无论是血清还是血浆标本一定不能溶血,轻微溶血(500mgHb/L)就可引起血钾升高3%。
维持细胞内外钾平衡是依靠细胞膜上的Na+-K+ATP酶,如果分析前全血标本被冷藏过,糖酵解被抑制,Na+-K+ATP酶不能维持内外平衡,而造成细胞内钾外移,使测定结果增高。在25℃存放1.5小时,血清钾会增高0.2mmol/L,4℃存放5小时会增高2 mmol/L。
相反,也会因为标本分离前被储存在37℃,由于糖酵解增强,使血钾进入到细胞内而血钾降低。如果白细胞数量增加,即便在室温放置也会引起血钾降低。
血钠测定标本可以在2~4℃或冰冻存放,红细胞中仅含血浆中的1/10,即便是溶血也不会造成多大影响。 脂血标本可高速离心分离后用离子选择电极方法检测。
(二)测定方法 1.火焰光度法 火焰光度法(FES)是一种发射光谱分析法,具有精密度高、特异性好以及成本低廉等特点,被为血清(浆)钠、钾测定的参考方法。 2. 离子选择电极法 离子选择电极法(ISE)仪器上装有含玻璃膜的钠电极和含液态离子交换膜(渗有缬氨霉素)的钾电极。
ISE检测原理是检测电极表面电位的改变,比较测定电极与参比电极表面电位变化的差值大小来估计样本中含量。 3. 分光光度法 分光光度法分为两类:一类是酶法,另一类是Na+、K+被结合到一类大环发色团时发生光谱的改变。
(1)酶法:Na+测定的酶法原理是在Na+离子存在下β-半乳糖苷酶水解邻-硝基酚-β-D-半乳吡喃糖苷(o-Nitrophenyl-β-D-galactopyranoside,ONPG),在420nm波长可测定产物邻-硝基酚(发色团)颜色产生的速率。 K+测定酶法例子是利用色氨酸酶,一定量的K+会增强酶的活性,用测定该反应酶活性的改变来判断K+浓度。
酶法的精密度和准确度可以与火焰光度法比较,但胆红素及溶血有一些影响,脂血标本因影响大而不能测定。 (2)大环发色团法 二、氯的测定 临床常用氯的检测方法有:汞滴定法、分光光度法、库仑电量分析法及最常用的ISE法。
(一)标本要求 氯测定可用血清、血浆、尿液、汗液等样本,Cl-在血清、血浆中相当稳定,肉眼可见的溶血不会造成有意义的干扰,因为红细胞中Cl-的浓度只是血清或血浆中的一半。 (二)方法学评价 1. 汞滴定法 2. 2. 分光光度法 3. 3. 库仑电量分析法 4. 4. 离子选择电极法 离子选择电极法(ISE)法是目前测定Cl-最好的方法,因为Cl-电极总是与Na+、K+电极配套使用,仅需要50μl~100μl血清、血浆或全血就可测出Na+、K+ 、Cl-的含量。
简便、快速、准确,是临床使用最多的方法。
1、向溶液中滴入硝酸酸化过的硝酸银溶液,有白色沉淀(氯化银沉淀)产生,证明有Cl-。
2、用铂丝蘸取少量溶液,置于酒精灯上灼烧,火焰呈黄色,可证含有Na+。
3、为了消除干扰,可取原试液加饱和氢氧化钡至呈明显碱性,引入试液中的 Ba2+ 应继以碳酸铵除之,最后用灼烧法除去铵盐。残渣用水加热浸取后,按1:8的滴数加乙酸铀酰锌试剂,并用玻璃棒摩擦管壁,如有柠檬黄色结晶形沉淀生成,证明有Na+存在。
4、可以取样分两份,向其中的一份中加入AgNO3,有白色沉淀生成;用洁净铁丝蘸取另一份溶液,然后在酒精灯上灼烧,火焰呈黄色,证明溶液中含NaCl。
5、取样品细粉5.0g,置瓷蒸发皿内,滴加新配制的淀粉混合液(取可溶性淀粉0.25g,加水2ml,搅匀,再加沸水至25ml,随加随搅拌,放冷,加0.025mol/L硫酸溶液2ml、亚硝酸钠试液3滴与水25ml,混匀)适量使晶粉湿润,置日光灯下观察,5分钟内晶粒不得显蓝色痕迹,则为NaCl。
参考资料
百度百科-氯化钠
苯甲酸钠的检验
溶液的澄清度与颜色 取本品1.0g,加水10ml使溶解,溶液应澄清无色.
氯化物法
取本品0.50g,置30ml瓷坩埚中,加硝酸溶液(1→10)2ml,混匀,于100ºC干燥至无明显湿迹,加碳酸钙0.8g,用少量水润湿,在100ºC干燥后,于电炉上低温炭化,再在600ºC马福炉中灼烧10分钟,冷却后,用硝酸溶液20ml溶解残渣,滤过,滤液置50ml比色管中,用水15ml洗涤瓷坩埚,洗液并入滤液中,加水至刻度,摇匀,作为供试品溶液.另取碳酸钙0.8g,加硝酸溶液22.5ml溶解,滤过,滤液置50ml比色管中,加15.0ml标准氯化钠溶液,用水稀释至刻度,摇匀,作为对照溶液.在两溶液中各加硝酸银试液0.5ml,摇匀,避光放置5分钟后比较,供试品溶液的浊度应浅于对照溶液的浊度(0.03%).
硫酸盐法
取本品0.40g,用水40ml溶解,边搅拌边慢慢加入稀盐酸4ml,静置5分钟,滤过.取续滤液20ml置50ml纳氏比色管中,加水至刻度,摇匀,作为供试品溶液;量取标准硫酸钾溶液2.4ml,置50ml纳氏比色管中,加稀盐酸2ml,加水至刻度,摇匀,作为对照溶液.在两溶液中各加氯化钡溶液5ml,摇匀,供试品溶液的浊度应浅于对照溶液的浊度(0.12%).
邻苯二甲酸法
取本品0.1g,加水1ml和间苯二酚硫酸溶液[取间苯二酚0.1g溶于稀硫酸(1→10)10ml中]1ml,于120~125ºC加热蒸去水分,继续加热90分钟,放冷,残渣用水5ml溶解.量取1ml,加入氢氧化钠溶液(43→500)10ml,摇匀,在紫外光灯(366nm)下检视.另取邻苯二甲酸氢钾61mg,精密称定,置1000ml量瓶中,用水溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取1ml和间苯二酚硫酸溶液1ml,同法处理,供试品溶液的荧光强度应弱于对照溶液.

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