苷的水解方法(苷的酶水解酶)

1.苷的酶水解有哪些酶

目的采用β-葡萄糖苷酶水解黄芪甲苷，并对其酶水解动力学进行初步研究。

方法以HPLC-ELSD法检测水解液中黄芪甲苷及水解产物环黄芪醇-6-O-β-D-葡萄糖苷（CMG）的量，以黄芪甲苷的水解转化率为指标，考察各反应因素对转化率的影响，并对该反应进行动力学研究。结果最佳反应条件为反应温度50℃，溶液pH值5.0，酶浓度460 U/mL，底物初始浓度0.1 mmol/L，反应时间48 h；在此条件下，水解转化率达到90%以上。

在最佳反应条件下，该水解反应过程符合单底物Michaelis Menten方程，其中最大反应速率（Vm）值为0.037 mmol/(L.min)，米氏常数（Km）值为5.8 mmol/L。结论采用β-葡萄糖苷酶水解黄芪甲苷制备CMG可行；商品化的β-葡萄糖苷酶并非黄芪甲苷的特异性水解酶。

2.苷类水解的注意事项

苷类水解的注意事项 ①按苷键原子不同，酸水解的易难顺序为：N-苷>O-苷>S-苷>C-苷。

②呋喃糖苷较吡喃糖苷易水解。

③酮糖较醛糖易水解。

④吡喃糖苷中吡喃环的C-5上取代基越大越难水解，因此五碳糖最易水解，其顺序为五碳糖>甲基五碳糖>六碳糖>七碳糖。如果接有-COOH，则最难水解。

⑤氨基糖较羟基糖难水解，羟基糖又较去氧糖难水解。

⑥芳香属苷，如酚苷因苷元部分有供电子结构，水解比脂肪属苷如萜苷、甾苷容易得多。

⑦苷元为小基团者，苷键横键的比苷健竖键的易水解，因为横键上原子易于质子化。苷元为大基团者，苷键竖键的比横键的易水解，因为苷的不稳定性促使水解。

⑧N- 苷易接受质子，但当N原子处于嘧啶或酰胺位置时，N-苷也难于用矿酸水解。