简述无菌技术注意事项
1.无菌操作时注意事项
体外培养细胞缺乏抗感染能力，所以防止污染是决定培养成功或失败的首要条件。即便使用设备完善的实验室。若实验者粗心大意，技术操作不规范，也会导致污染。因而.为在一切操作中为最大可能的保证无菌.每一项工作都必须做到有条不紊和完全靠。
【培养前准备】在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。有关数据的计算要事先做好。根据实验要求，准备各种所需器材和物品、清点无误后将其放置操作场所（培养室、超净台）内，然后开始消毒。这可以避免开始实验后.囚物品不全往返拿取而增加污染机会。
【操作野消毒】无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面—次（拖布要专用）.紫外线照射消毒30-50min，超净工作台台面每次实验前要用75%酒精擦洗。然后紫外线淌毒30min。在工作台面消毒时切勿将培养细胞和培养用液同时照射紫外线，消毒时工作台面上用品不要过多或重叠放置.否则会遮挡射线降低消毒效果。—些操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。
【洗手和着装】原则上和外科手术相同。平时仅做观察不做培养操作时，可穿装细胞培养室内紫外线照射30min的清洁工作服。在利用超净台工作时，因整个前臂要伸入箱内，应着长袖的清洁工作服，并于开始操作前要用75%酒精消毒手。如果实验过程中手触及可能污染的物品和出入培养室都要重新用消毒液洗手。进入原代培养室需彻底洗手还要戴口罩、着消毒衣帽。
【火焰消毒】 在无菌环境进行培养或做其它无菌工作时，首先要点燃酒精灯或煤气灯。以后一切操作，如按装吸管帽、打开或封闭瓶口等，都需在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意：金属器械不能在为焰中烧的时间过长，以防退火，烧过的金属镊要待冷却后才能挟取组织，以免造成组织损伤。吸取过营养液后的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管头中营养液能烧焦形成炭膜，再用时会把有害物带入营养液中。开启、关闭长有细胞的培养瓶时，火焰灭菌时间要短。防止因温度过高烧死细胞。另外胶塞过火焰时也不能时间长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞。
【操作】 进行培养时，动作要准确敏捷，但又不必太快，以防空气流动，增加污染机会。不能用手触及已消毒器皿，如已接触，要用火焰烧灼消毒或取备品更换。为拿取方便，工作台面上的用品要有合理的布局，原则上应是右手使用的东西放置在右侧，左手用品在左侧，酒精灯置于中央。工作由始至终要保持一定顺序性，组织或细胞在未做处理之前，勿过早暴露在空气中。同样，培养液在未用前，不要过早开瓶；用过之后如不再重复使用，应立即封闭瓶口直立可增加落菌机会。吸取营养液、PBS、细胞悬液及其它各种用液时，均应分别使用吸管，不能混用，以防扩大污染或导致细胞交叉污染。工作中不能面向操作野讲话或咳嗽，以免唾沫把细菌或支原体带入工作台面发生污染。操作前用酒精擦拭超净台面及双手。手或相对较脏的物品不能经过开放的瓶口上方，瓶口最易污染，加液时如吸管尖碰到瓶口，则应将吸管丢掉。
2.做无菌技术操作时要注意什么?
无菌操作同样是护士最基础，最常用，最能体现护士专业水平的一项技术操作。
临床护士在做任何的一项操作时，都能涉及到此项技术，所以说它是最基础最常用的一项技术操作。无菌技术还涵盖了下列操作内容：无菌钳、无菌包、无菌盘、无菌手套等。
这几项操作有一定的难度，需要经过刻苦的练习才能全面掌握。无菌技术操作要注意如下几点：（1） 凡是污染的物品，必须重新灭菌后方可使用。
（2） 取出的无菌物品未用，也不可再放回无菌容器内。（3 ）无菌钳及容器每周消毒二次。
（4） 已打开的无菌包必须注明开包日期和时间，保存时间为二十四小时。（5 ）无菌治疗盘使用时间不得超过四小时。
（6） 无菌操作时，不可穿越无菌区。（7） 无菌手套一旦发现破损，必须立即更换。
（8） —套无菌物品，只能一个病人使用，不能二人共同使用。
3.进行无菌操作前应
培养基的制作注意事项：1 注意营养物质的浓度比和c/n比2 控制ph条件3 原料来源的选择4 灭菌处理无菌操作注意事项：1。
实验进行前，无菌室及无菌操作台（laminar flow） 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每 次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间 污染。
实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间 隔应让无菌操作台运转10 分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。
2。 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可 以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。
实验用品以70 % ethanol 擦 拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操 作。
3。 小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。
勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打 开之容器正上方操作实验。 容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45° 角取用， 尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
4。 工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。
对于来自人类或是病毒 感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台（至少class ii）。 操作过程 中，应避免引起aerosol 之产生，小心毒性药品，例如dmso 及tpa 等，并避免尖锐 针头之伤害等。
5。 定期检测下列项目： 5。
1。 co2 钢瓶之co2 压力 5。
2。 co2 培养箱之co2 浓度、温度、及水盘是否有污染（水盘的水用无菌水，每周更换）。
5。3。
无菌操作台内之airflow 压力，定期更换紫外线灯管及hepa 过滤膜，预滤网（300 小时/预滤网，3000 小时/hepa）。 6。
水槽可添加消毒剂（zephrin 1:750），定期更换水槽的水。
4.谁能告诉我无菌操作的具体注意事项
无菌技术：在执行医疗护理抄作过程中，防止一切微生物侵入肌体和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作方法和管理方法。
无菌技术操作原则：一是环境要清洁；二是进行无菌操作时，衣帽穿戴要整洁，口罩须着住口鼻。
现在有人说：无菌操作没有20分钟就可以不戴口罩。这样行吗？什么是无菌技术和无菌技术操作？规章制度就得严格执行，没有规矩就不成方圆！我就亲眼看见对药时不戴口罩，边讲话边抽药，注意力未集中，把药给配错了。
护士，仪表端庄，衣帽整洁；无菌操作时该戴口罩，该用无菌手套，正规操作，一丝不苟。自己放心，病人放心。
5.无菌技术操作的基本要求有哪些
无菌技术操作的基本要求：
1、操作前准备
操作环境应清洁、宽敞、定期消毒；物品布局合理；无菌操作前半小时应停止清扫工作、减少走动、避免尘土飞扬；工作人员应做好个人准备，戴好帽子、口罩，修剪指甲并洗手，必要时穿无菌衣、带无菌手套。
2、操作中保持无菌
工作人员应面向无菌区，手臂应保持在腰部或操作台台面以上，不可跨越无菌区避免面对无菌区谈笑、咳嗽、打喷嚏；
用无菌持物镊取用物品。无菌物品一经取出，即使未用，也不可放回无菌容器内。一套无菌物品仅供一位患者使用，避免交叉感染；无菌操作中，无菌物品疑有污染或已被污染，应予更换并重新灭菌。
3、无菌物品保管
无菌物品必须与非无菌物品分开放置；无菌物品不可暴露于空气中，应存放于无菌包或无菌容器中，无菌包外须标明物品名称、灭菌日期，并按失效期先后顺序排放。
定期检查无菌物品的灭菌日期及保存情况。无菌包在未被污染的情况下保存期一般为7天，过期或受潮应重新灭菌。
扩展资料：
无菌技术操作目的：
取用、放置、保存无菌物品符合无菌操作原则，保证无菌物品和无菌区域不被污染。防止病原微生物侵入或传播给他人。
适用领域：
进行微生物学实验、外科手术、换药、注射时，均需严格遵守无菌操作规定。
参考资料来源：搜狗百科——无菌技术
6.培养基的制作及无菌操作技术常见的注意事项
培养基的制作注意事项：
1 注意营养物质的浓度比和C/N比
2 控制pH条件
3 原料来源的选择
4 灭菌处理
无菌操作注意事项：
1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台（laminar flow） 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 %
ethanol 擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每
次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间
污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间
隔应让无菌操作台运转10 分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。
2. 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可
以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以70 % ethanol 擦
拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操
作。
3. 小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打
开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45° 角取用，
尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
4. 工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒
感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台（至少Class II）。操作过程
中，应避免引起aerosol 之产生，小心毒性药品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖锐
针头之伤害等。
5. 定期检测下列项目：
5.1. CO2 钢瓶之CO2 压力
5.2. CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染（水盘的水用无菌水，每周更换）。
5.3. 无菌操作台内之airflow 压力，定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜，预滤网（300
小时/预滤网，3000 小时/HEPA）。
6. 水槽可添加消毒剂（Zephrin 1:750），定期更换水槽的水
