常用固定液的种类及(色谱分析固定液有哪些分类)

1.色谱分析固定液有哪些分类

一、烃类： 是非极性固定液，包括烷烃和芳烃。

常用的有角鲨烷（相对极性定为零）、石蜡烷和聚乙烯等。 二、硅氧烷类： 是通用型固定液，从弱极性到极性都有，种类多，使用温度较高，溶解能力强，使用范围广。

1、聚二甲基硅氧烷类： 目前使用最广泛的固定液，可使用温度范围大，对一般的有机化合物有较好的溶解能力。 常用的固定液有：SE-30、OV-1、OV-101、SP2100、SF-96、DC-200和UCW982等。

2、聚苯基甲基硅氧烷类： 由于硅原子上引入了苯基，与甲基硅酮相比较，芳香化合物的溶解度升高，极性组分保留值增大。

2.气液色谱常用的固定液有哪几类

气相色谱柱常用的固定液 各类很多，常用的有

一、非极性

1、100%Dimethyl polysiloxane,100%聚二甲基硅氧烷，商品名：AC1,OV-101,OV-1,DB-1,SE-30,HP-1,RTX-1,BP-1

二、弱极性

2、5%Phenyl dimethyl polysiloxane, 5%二苯基（95%）二甲基聚硅氧烷，商品名：AC5,SE-52,

3、5% Phenyl 1%vinyl dimethyl polysiloxane,5%二苯基1%乙烯基（94%）二甲基聚硅氧烷，商品名：OV-5,DB-5,SE-54,HP-5,RTX-5,BP-5

注：2、3常无严格区分，通常混称。

三、中等极性

4、50%Phenyl dimethyl polysiloxane, 50%二苯基（50%）二甲基聚硅氧烷，商品名：OV-17,HP-50,RTX-50

5、14%Cyanopropyl phenyl polysiloxane, 14%氰丙基苯基（其中7%氰丙基7%苯基）（86%）二甲基聚硅氧烷，商品名：AC10,OV-1701,DB-1701,RTX-1701

6、50% Cyanopropyl phenyl polysiloxane,50%氰丙基苯基（其中25%氰丙基25%苯基）（50%）二甲基聚硅氧烷，商品名：AC225,OV-225,BP-225,DB-225,HP-225,RTX-225

四、强极性

7、polyethylene glycol，聚乙二醇，商品名：AC20,PEG20M,HP-INNOWAX(FFAP是其与2-硝基对苯二甲酸的反应产物)

常用毛细管色谱柱对应表

SE-30、OV-1，化学组成：100%甲基聚硅氧烷（胶体），所属极性：非极性，适用范围：碳氢化合物、农药、酚、胺，对照牌号：DB-1、BP-1、007-1、SPB-1 、RSL-150、CPSRL-5 、HP-1.

OV-101，化学组成：100%甲基聚硅氧烷（流体），所属极性：非极性 ，适用范围：氨基酸、碳氢化合物、药物胺 ，对照牌号：HP-100、SP-2100

SE-52、SE-54，化学组成：5%苯基聚硅氧烷、1%乙烯基 5%苯基甲基聚硅氧烷 ，所属极性：弱极性 ，适用范围：多核芳烃、酚、酯、碳氢化合物、药物胺，对照牌号：DB-5 、BP-5、SPB-5、007-2 、OV-73、CPSIL-8、RSL-120 、HP-5.

OV-1701，化学组成：7%氰丙基、7%苯基甲基聚硅氧烷，所属极性：中极性，适用范围：药物、醇、酯、硝基苯类、除莠剂，对照牌号：BP-10、RSL-1701、DB-1701、HP-1701、CPISL-19.

OV-17，化学组成：50%苯基 50%甲基聚硅氧烷，所属极性：中极性，适用范围：药物、农药，对照牌号：DB-17、HP-17、007-17、SP-2250、RSL-300.

OV35，化学组成：35%苯基 65%二甲基聚硅氧烷，所属极性：中极性.

OV-225，化学组成：25%氰丙基、25%苯基、甲基聚硅氧烷，所属极性：中极性，适用范围：脂肪酸甲脂、碳水化合物、中行固醇，对照牌号：DB-225、HP-225、BP-225、CPSIL-43、RSL-500.

OV-275，化学组成：100%氰丙基聚硅氧烷，所属极性：强极性.

XE-60，化学组成：25%氰乙基、75%二甲基聚硅氧烷，所属极性：中极性，适用范围：酯、硝基化合物，对照牌号：DB-225、HP-225、CPSIL-43、RSL-500.

FFAP，化学组成：聚乙二醇硝基苯改性，所属极性：极性，适用范围：酸、醇、醛、酯、酮、腈，对照牌号：SP-1000、OV-351、BP-21、HP-FFAP.

PEG-20M，化学组成：聚乙二醇-20M，所属极性：极性，适用范围：酸、醇、醛、酯、甘醇，对照牌号：HP-20M、DB-WAX、007-20M、BP-20.

3.最常用到的几种组织固定液

(1)中性缓冲甲醛。该液能够固定大多数组织结构，对脂类有较好的固定效果。免疫组化、原位杂交等试验都可以使用。本液还可以长时间存放，是实验室常备的固定液之一。固定液浸透较慢，固定时间不限，浸透之后可以长时间存放（免疫组化和原位杂交标本建议不要这么做）。美中不足是染色时酸性染料着色不佳，并且本液对糖类没有固定作用。

(2)AAF。该液由醋酸（A）、酒精（A）和甲醛（F）为主要成分，广泛用于动植物组织的固定和各种实验检测，植物固定则是首选。固定液渗透均一，速度很快。固定时间一般为4 ~ 24 h。此液处理后，染色结果细腻，但酸性染料着色力下降。本液配制后可以短时间放置。

(3)Bouin。过去常用的一种固定液，主要用于软化皮肤或者富含结缔组织的标本，在胚胎标本处理中使用很广。用本液处理后，酸性染料着色鲜艳。但是，由于含有苦味酸，不能用于原位杂交等实验检测。此外，本液对很多细胞器的破坏较大，尤其不适于固定肾脏标本。经本液固定的标本，尺寸应尽可能小，否则内外固定的效果有所差别。本液可以较长时间存放，但标本在其中不应久存，固定8 ~ 24 h为宜。

(4)Zamboni。用于免疫组化和免疫电镜的首选固定液。保存细微结构和抗原特性最好的固定液之一。固定液浸透速度较慢，要求标本不能过大，常用于血管灌注。该液可以长时间存放，标本在其中也可以保存较长时间，抗原封闭作用相对较弱。由于含有苦味酸，故不用于原位杂交试验。

(5)Helly,Susa,Zenker。这是三种比较相近的固定液，含有汞盐和重铬酸钾。经这类固定液处理，标本对酸性和碱性染料均有较好的亲和能力。染色处理前需要脱汞和脱碘操作。目前除了几种传统染色更鲜艳外，并无其他优势。

4.免疫组化实验中固定液的选择遵循哪些原则

免疫组化实验中固定液的选择是免疫组化成功与否的基础。

用于免疫组化实验的固定液种类较多，性能各不一样。不同抗原，其稳定性各不相同，对固定液的耐受性 差异较大。

所以，除要了解不同固定剂的特性外，不同的抗原和标本需经过反复试验，必要时可作多种固定液对比，从而选出理想的固定液。选择最佳固定液的标准 是：①最好地保持细胞和组织的形态结构；②最大限度地保存抗原的免疫活性。

中性缓冲多聚甲醛（或福尔马林）液是适应性较为广泛的固定液。值得注意的是免疫 组化实验中禁用含重金属的固定液。

5.实验室常用固液分离的方法及注意事项

最常用的就是过滤，也会用到沉淀后吸取上清夜的方法。

过滤常用的工具有漏斗，在漏斗中放入过滤材料，然后把需要分离的固液混合物倒入漏斗即可。

过滤材料有滤纸、棉花、纱布等，滤纸又分为快速、中速、慢速滤纸。

选用哪种材料过滤取决于实验对滤夜的澄清度、杂质度的要求.必要时，可以多次过滤。

从废水中除去固体一般采用筛或沉淀方法。污泥处理中采用的分离方法有污泥重力浓缩、污泥的浮选或污泥的机械脱水。水处理中有微滤、澄清和深床过滤等方法。

把固体和液体分开的过程都是固液分离，方法非常多，沉降，过滤，膜过滤，压滤，真空，离心机。

固液分离机是利用离心力，分离液体中固体颗粒物和絮状物的机械。

6.固定液的选择原则

根据被分离组分和固定液分子间的相互作用关系，固定液的选择一般根据所谓的“相似性原则”，即固定液的性质与被分 离组分之间的某些相似性，如官能团、化学键、极性、某些化学性质等，性质相似时，两种分子间的作用力就强，被分离组分在固定液中的溶解度就大，分配系数 大，因而保留时间就长；反之溶解度小，分配系数小，因而能很快流出色谱柱。

下面就不同情况进行讨论：

a、分离极性化合物，采用极性固定液。这时样品各组分与固定液分子间作用力主要是定向力和诱导力，各组分出峰次序按极性顺序，极性小的先出峰，极性越大， 出峰越慢；

b、分离非极性化合物，应用非极性固定液，样品各组分与固定液分子间作用力是色散力，没有特殊选择性，这时各组分按沸点顺序出峰，沸点低的先出峰。对于沸 点相近的异构物的分离，效率很低；

c、分离非极性和极性化合物的混合物时，可用极性固定液，这时非极性组分先馏出，固定液极性越强，非极性组分越易流出；

d、对于能形成氢键的样品。如醇、酚、胺和水的分离，一般选择极性或氢键型的固定液，这时依组分和固定液分子间形成氢键能力大小进行分离。“相似相容性原 则”是选择固定液的一般原则，有时利用现有的固定液不能达到满意的分离结果时，往往采用“混合固定液”，应用两种或两种以上性质各不相同的，按适合比例混 合的固定液，使分离有比较满意的选择性，又不致使分析时间延长。然而，在实际工作中选择固定液往往是参考资料或文献介绍的实例来选用固定液的。