多糖除蛋白质的方法(将刚提出的一种水溶性多糖要脱蛋白处理,方法)

1.将刚提出的一种水溶性多糖要脱蛋白处理,有哪些方法

除酶降解外，常用的去除多糖中蛋白质的方法还有：Sevag法、三氟三氯乙烷法、三氯醋酸法，这些方法的原理是使多糖不沉淀而使蛋白质沉淀，其中Sevag方法脱蛋白效果较好，它是用氯仿：戊醇或丁醇，以4:1比例混合，加到样品中振摇，使样品中的蛋白质变性成不溶状态，用离心法除去。

Sevage 法：利用蛋白质在三氯乙烷等有机溶剂中变性的特点，将提取液与 Sevage试剂[氯仿：正丁醇=5:1(V/V)]5:1 混合，振荡，离心，变性后的蛋白质介于提取液与 Sevage 试剂交界处。此法的优点是条件温和，不会引起多糖的变性。

三氯醋酸法 于样品液中加入适量的三氯醋酸，混匀后静置过夜，离心过滤弃去滤渣，收集滤液，测定糖浓度和蛋白质浓度。

2.提纯多糖时用Sevage法除蛋白的具体方法

。。。。。。自己以后要多看资料，这是自己判断的事情。

这个比例其实都行，没有绝对的对错。你就选择1:4 震荡时间自己决定，应为如果你要拖干净的话，也可以多次每次时间短啊，这个和时间长次数少效果是一样的。 离心好！并且告诉你样品稍微多准备点，如果你的样品蛋白质含量高，你去蛋白次数过多的话，你的样品会在反复的转移中损失很大。

顺便带上手套，口罩，这个东西是蛋白质变性，弄到你手上最多吊点皮（如果你不在乎） 气味很刺激。化学实验都是和毒品打交道，尽量注意安全卫生。

3.如何去除多糖溶液中的蛋白质杂质

去除杂蛋白时，将多糖溶液：氯仿：正丁醇以25:5:1 体积比加入分液漏斗中，振摇30min后，8000r/min，离心10min去除白色沉淀。重复操作10~12次，直至无沉淀为止。

酶的活性受环境pH的影响极为显著。通常各种酶只有在一定的pH范围内才表现它的活性。一种酶表现其催化活性最高时的pH值称为该酶的最适pH。低于或高于最适pH时，酶的活性逐渐降低。不同酶的最适pH值不同，例如，胃蛋白酶的最适pH为1.5一2.5，胰蛋白酶的最适pH为8等酶的最适pH受反应物性质和缓冲液性质的影响。例如，唾液淀粉酶的最适PH约为6.8，但在磷酸缓冲液中，其最适pH为6.4一6.6，在醋酸缓冲液中则为5.6。

大浓度的话，结晶是个好办法。糖的结晶比蛋白质简单多了。另外，层析也很简单啊。有条件的话层析几次就完全去除了。